AMPK調控內質網應激抵抗COPD氣道上皮細胞凋亡的機制研究

《AMPK調控內質網應激抵抗COPD氣道上皮細胞凋亡的機制研究》是依託中南大學，由袁婷擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：AMPK調控內質網應激抵抗COPD氣道上皮細胞凋亡的機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：袁婷
• 依託單位：中南大學

項目摘要

香菸煙霧中的氧化性物質可通過內質網應激誘導氣道上皮細胞發生凋亡，促進慢性阻塞性肺疾病（COPD）發生髮展。我們發現腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）可能對香菸煙霧引起的氣道上皮細胞的凋亡具有緩解作用，進而推測：上調氣道上皮細胞AMPK的表達將有助於緩解香菸煙霧所致的內質網應激誘導性凋亡，可能通過AMPK/FOXO1信號通路上調內質網應激關鍵伴侶分子ORP150的表達來實現，從而延緩COPD的發展速度。本項目在申請者前期研究的基礎上，通過調節AMPK的表達水平，利用免疫組化、western-blot、Real time-PCR、免疫共沉澱、流式細胞學測凋亡、TUNEL等試驗技術，從動物及細胞水平來研究AMPK對香菸煙霧誘導的氣道上皮細胞內質網應激誘導性凋亡的保護作用及具體機制，為COPD的臨床和亞臨床干預提供新的理論依據和新的干預靶點。

結題摘要

本課題在我們以前對COPD發病過程中存在內質網應激的研究基礎上，進一步研究發現AMPK在發病過程中可能起到保護作用，並且與ORP150和FOXO1的表達水平密切相關。採用煙燻的方法構建COPD大鼠模型，我們發現AMPK對內質網應激所致凋亡具有保護作用，且可能通過調節ORP150的表達實現。為了進一步明確AMPK的作用，我們體外培養HBE細胞，採用 shRNA 技術研究AMPK與ORP150之間的信號通路，我們發現AMPK-FOXO1通路在香菸煙霧提取物（CSE）所導致的細胞損傷中起著非常關鍵的作用，其可保護細胞免於凋亡。而此通路通過調節ORP150表達起到保護細胞的作用，提示了AMPK可作為慢性阻塞性肺疾病（COPD）的治療方法，而FOXO1可能是其發揮作用的靶點。