《4.1G對惡性外周神經鞘瘤的抑制作用及機制研究》是依託北京大學，由楊邵敏擔任負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：4.1G對惡性外周神經鞘瘤的抑制作用及機制研究
- 項目負責人：楊邵敏
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
惡性外周神經鞘瘤（MPNST）多是高度惡性肉瘤。我們前期發現，4.1蛋白中的4.1G在正常施萬細胞中高表達，但在MPNST中表達下降甚至缺失。由於4.1是膜蛋白和皮層細胞骨架間的橋樑，而MPNST中膜受體EGFR通路異常活化，並且其它4.1蛋白能抑制細胞增殖，因此推測4.1G通過調節EGFR抑制MPNST的增殖，發揮抑癌基因作用。本課題擬首先利用人MPNST細胞系，以4.1G過表達、敲減/逆轉及裸鼠坐骨神經原位種植成瘤試驗，驗證4.1G對MPNST增殖的抑制；然後以EGF/+EGFR抑制劑處理，研究4.1G對EGFR及下游MAPK/ERK和PI3K/Akt通路的調節；以螢光標記EGF追蹤和膜蛋白生物素標記法，初步探索4.1G通過受體內吞轉運調節EGFR通路的分子機制；以人實體腫瘤標本驗證4.1G的抑癌作用。以期闡明4.1G表達對MPNST預後的臨床意義，為指導EGFR靶向治療提供理論基礎。
結題摘要
我們前期研究發現，4.1G蛋白在正常外周神經施萬細胞中高表達，但在外周神經腫瘤良性神經纖維瘤和惡性外周神經鞘瘤（MPNST）中表達下降，部分MPNST中表達缺失，提示4.1G可能是MPNST的抑癌基因。本課題對於4.1G蛋白在施萬細胞腫瘤發生和發展進程中的作用和調控進行了有意義的初步探索。 本課題首先進行細胞培養體外研究。採用ATCC細胞庫的細胞係為體外研究對象。包括人MPNST細胞系sNF96.2、sNF02.2和永生化的正常施萬細胞RT4，以人正常外周神經組織為對照。免疫印跡和免疫螢光染色法在蛋白水平上證實正常的RT4細胞和惡性MPNST細胞在4.1G表達水平和4.1G蛋白亞細胞定位方面存在差異。並且，同樣是MPNST細胞系，局部復發的96.2細胞和發生肺轉移的02.2細胞，其生長速度、細胞形態存在顯著不同。經過基因克隆我們發現，從正常人外周神經中克隆出的4.1G異構體與從96.2細胞中克隆出的異構體基本相似，但是發生肺轉移的02.2細胞中表達較短剪下體。經過構建不同異構體的真核表達載體，證實不同異構體的亞細胞定位顯著不同，提示其對於細胞膜蛋白、細胞膜相關調控分子的穩定、細胞分裂、增殖等發麵發揮重要作用。本研究在如下方面有重要意義：轉移能力不同的MPNST細胞系表達4.1G異構體不同，提示其既有抑癌基因作用又有促癌基因作用。此方面研究尚未見國內和國際報導。進一步研究較短異構體促進細胞侵襲轉移的機制將對未來惡性腫瘤的治療提供重要靶點。研究較長異構體對細胞轉移能力的抑制則可能為MPNST轉移生物學行為的預測、膜蛋白及受體調控、膜蛋白相關靶向治療提供重要根據。
