黃瓜綠斑駁花葉病毒，學名 Cucumber green mottle mosaic virus，異名 Cucunber virus 3, Cucumis virus 2，英文名 Cucumber green mottle mosaic virus。是由Ainsworth (1935)首次記述， 在歐洲、印度和日本葫蘆科植物上發現的一種RNA病毒，病毒粒子細管狀長度約300×18 nm. 病毒易通過汁液傳播，但病毒的寄主範圍較窄，可通過樹葉的接觸，植物栽培中的操作，土壤及黃瓜種子傳毒。
基本介紹
- 中文名：黃瓜綠斑駁花葉病毒
- 外文名： Cucumber green mottle mosaic virus
- 發現時間：1935年
- 發現者：Ainsworth
- 寄生植物：黃瓜，西瓜和甜瓜
- 病毒粒子結構：直形棒狀，300×18nm
- 科：帚狀病毒科（Virgaviridae）
- 屬：菸草花葉病毒屬(Tobamovirus)
發生分布,典型症狀,寄主植物,形態特徵,生物學,傳播途徑,檢測方法,檢疫防治,危害情況,
發生分布
黃瓜綠斑駁花葉病毒病20世紀30年代在歐洲國家發生，60年代因黃、西瓜和瓠瓜而傳入印度和日本，80年代傳入台灣。2002年中國從日本引進種苗中截獲，2004年廈門從日本進口的南瓜種子上檢測到CGMMV，2005年中國遼寧省蓋州市感染CGMMV 在我國遼寧蓋州地區造成西瓜大面積毀滅,受害面積達333 hm，約13hm絕收，CGMMV 現在中國部分地區已造成西瓜毀滅性的損失。農業部發布的第788 號公告，鄭重宣布將CGMMV 確定為全國農業植物檢疫性有害生物，屬國家三類檢疫性病害。
目前，CGMMV 在全球主要分布在希臘( 克里特島)、羅馬尼亞、中國台灣、巴西( Sao Francisco 地區)、
前蘇聯、日本、伊朗、丹麥、印度( Delhi)、芬蘭、德國、英國、沙烏地阿拉伯、韓國、以色列、波蘭；在中國主要分布於遼寧、河北、湖北、廣東和山東，發生率達80%，河南、四川、江西、上海、新疆、陝西及寧夏等省份還未發現。
典型症狀
CGMMV侵染植物產生的症狀因寄主、環境條件及株系的不同而有差異，一般會使葫蘆科作物的植株生長緩慢、矮化，結果延遲，嚴重的導致不孕；葉片出現色斑、水皰及變形；果實外部通常沒有症狀或出現色斑，內部果肉往往出現變色、纖維化及腐爛；有的病株不出現症狀而表現為無症侵染。
西瓜感染病毒症狀
在植株的幼葉出現不規則的褪綠色或淡黃色，呈斑駁花葉狀，使綠色部分隆起葉面凸凹不平，葉緣向上翻卷，葉片略變窄細。葉片老化後症狀逐漸不明顯，與健葉無大區別。病果表面出現濃綠色略圓的斑紋，有時在中央出現壞死斑。果梗再現褐色壞死條紋。果肉周邊接近果皮部呈黃色水漬狀，進而種子周圍的果肉變紫紅色或暗紅色水漬狀，果肉內出現塊狀黃色纖維，逐漸成為空洞。成熟果果肉全變成暗紅色，內有大量空洞呈絲瓜瓤狀，軟化，腐爛變味，不能食用。
甜瓜感染病毒症狀
生長初期接種後7d～10d，頂部第3片～4片幼葉出現黃色斑或花葉，遠看頂部附近呈黃色，以後展開的3片～4片葉症狀反而減輕，再後的3片～4片葉又出現黃花葉，不斷變化。成株側枝葉出現不整形或星狀黃花葉，生育後期頂部葉片有時再現大型黃色輪斑。果實有兩類症狀，一種在幼果再現綠色花葉，肥大後期呈綠色斑。另一種在綠色部的中心出現灰白色部分。
黃瓜感染病毒症狀
開始在新葉出現黃色小斑點，以後黃色部分擴展成花葉，並發生濃綠瘤狀突起，有時黃色小斑點沿葉脈擴展成星狀，或脈間褪色出現葉脈綠帶。果實在病輕時只發生淡黃色圓形小斑點，病重時出現濃綠色瘤狀突起變成畸形，嚴重時可以造成絕產。
寄主植物
自然界寄主：
黃瓜，西瓜和甜瓜(Cucumis melo)作物，不能侵染西葫蘆(Cucurbita pepo)，在葫蘆(Lagenaria siceraria)上也有發現。
大多數英國株系只侵染葫蘆科植物(Cucurbitaceae)；日本和印度的有些株系和英國分離的一個株系能在莧色藜(Chenopodium amaranticolor)和/或曼陀羅（Datura stramonium）上產生局部枯斑(Komuro et al., 1971; Tochihara & Komuro, 1974)。東歐的桃葉珊瑚分離物能夠在三生煙，珊西煙(Brcák et al., 1962)上產生局部褪綠斑，在昆藜上產生系統斑紋。
鑑別寄主：
沒有特別的鑑別寄主，對於某些株系鑑定來說，血清學測試和電鏡觀察是必需的。
黃瓜（Cucumis sativus）－抗病。無局部症狀；接種2星期後產生輕微的明脈，繼而出現明亮綠黑色斑紋，水泡，葉片畸形（特別是在冬天），植株矮化。
莧色藜（Chenopodium amaranticolor）－經西瓜株系、Yodo株系和印度C株系(Tochihara & Komuro, 1974)侵染後出現細小局部壞死斑，而歐洲黃瓜株系不出現這種症狀；無系統侵染。
曼陀羅（Datura stramonium）－Yodo株系和日本的黃瓜株系在接種後1星期產生能擴散的局部褪綠斑；無系統侵染。
毒源繁殖保存寄主：
黃瓜是病毒繁殖與保存的優良寄主，但毒源最好是-20℃葉片凍存或汁液凍存。
測定寄主：
對大多數株系來說沒有非常滿意的測定寄主，但對於日本黃瓜株系來說，曼陀羅（Datura stramonium）是最好的鑑別寄主；莧色藜可以作為日本Yodo株系與西瓜株系及印度C株系的測定寄主(Tochihara & Komuro, 1974)。
株系：
有些株系可以用血清學方法或在莧色藜（C. amaranticolor）和曼陀羅（D. stramonium）上的症狀反應來區分(Tochihara & Komuro, 1974)。
主要株系：
典型株系(Ainsworth, 1935)－黃瓜綠色斑駁花葉病毒（Cucumber green mottle mosaic virus），在歐洲和英國報導，在果實上不出現症狀，某些條件下在莧色藜上出現一些枯斑；不侵染曼陀羅（Datura stramonium）和矮牽牛（Petunia hybrida）。
黃瓜桃葉珊瑚花葉病毒（Cucunber aucuba mosaic virus）(Bewley, 1923)－=Cucumber virus 4(Ainsworth, 1935) = Cucumis virus 2A (Smith, 1957).在英國和歐洲報導，印度也有類似報導(Vasudeva et al., 1949)。在果實上誘發顯症，莧色藜上出現局部枯斑，但不在曼陀羅（Datura stramonium）上引發枯斑。
西瓜株系（Watermelon strain）－在日本報導(Komuro et al., 1971)。莧色藜上出現局部枯斑，但不在曼陀羅（Datura stramonium）上引發枯斑。
日本黃瓜株系（Japanese cucumber strain）－在日本報導(Komuro et al., 1971)。在黃瓜上導致嚴重的果實變形，在曼陀羅（Datura stramonium）引發局部枯斑，但在莧色藜（C. amaranticolor）不引發局部枯斑。
Yodo株系（Yodo strain）－在日本Yodo報導(Kitani et al., 1970; Tochihara & Komuro, 1974).，在黃瓜上導致果實扭曲，在莧色藜，曼陀羅和矮牽牛（Petunia hybrida）上產生局部枯斑。
印度C株系（Indian strain C）－在印度bottlegourd中分離(Vasudeva et al., 1949)，產生水泡狀色斑，矮縮及減產；在莧色藜C. amaranticolor上引發局部枯斑，曼陀羅D. stramonium上為隱症，不侵染菸草和矮牽牛（Petunia hybrida）。
形態特徵
病毒粒子特性：
沉澱係數(s°20,w)：185 S，195 S (Brcák et al., 1962) ；
等電點：pH：4.98(Oster, 1951; Brcák et al., 1962)；
A260/A280: 1.38. Amax(260)/Amin(249): 1.05. (Values corrected for light-scattering; M. Hollings, unpublished data).
病毒粒子結構：
直形棒狀，300×18nm，一個螺旋23?，半徑20 ?，RNA位於距中心40 ?處，一個螺旋由49個亞單位或3個轉角組成(Holmes & Franklin, 1958)。
病毒粒子組成：
核酸：
單鏈線性RNA，基因組長度6.5kb，基因組為單一組分，鹼基比：G：A：C：U=25:26:19:30(Linnasalmi & Toiviainen, 1974), 占粒子重的6%(Knight, 1954)。基因組不帶Poly（A）尾巴，而具有tRNA-like結構。
GenBank登錄號：
D12505 Em(40)_vi:MCGSHCG Gb(84)_vi:MCGSHCG 黃瓜綠斑駁花葉病毒(CGMMV) 全長基因組. 10/92 6,421bp.
J02054 Gb(84)_vi:MCGCPW 黃瓜綠斑駁花葉病毒外殼蛋白基因. 9/83 1,071bp.
J04322 Em(40)_vi:TOBMCG30 Gb(84)_vi:MCG30KP 黃瓜綠斑駁花葉病毒30K蛋白全長基因,180K 蛋白和外殼蛋白基因3個序列.
蛋白：
占粒子重的94%，三個黃瓜分離物，每個都含有15個胺基酸，平均160個殘基/亞單位，分子量17.2kDa(Linnasalmi & Toiviainen, 1974)，三個歐洲的黃瓜分離物的胺基酸組成與西瓜分離物(Nozu et al., 1971)及CV-4分離物（桃葉珊瑚花葉病毒）(van Regenmortel, 1967)很相似，而黃瓜桃葉珊瑚花葉分離物與以上分離物的胺基酸組成有些差異（Tung & Knight ,1972； Linnasalmi & Toiviainen , 1974).
生物學
血清學及親緣關係：
病毒具有很強的抗原性。與其他菸草花葉病毒屬（tobamovirus）出現的症狀形態學上類似，血清學上也相關。西瓜株系與英國的兩個株系及印度的C株系有較近的親緣關係，但與日本的黃瓜株系、Yodo株系及菸草花葉病毒卻有較遠的親緣關係，而與番茄花葉病毒及菸草花葉病毒屬的其他成員的親緣關係更遠(Nozu et al., 1971; Tochihara & Komuro, 1974; van Regenmortel, 1975; M. Hollings, unpublished data).。日本黃瓜株系與Yodo株系的親緣關係很近。
汁液穩定性：
所有株系都是極端穩定的。典型株系90℃處理10min失去侵染能力 (Smith, 1957)，黃瓜株系與yodo株系的致死溫度為90-100℃(Kitani et al., 1970; Nagai et al., 1974),印度C株係為86-88℃(Vasudeva et al., 1949)。病毒汁液稀釋限點為10-6-10-7(Nagai et al., 1974).,常溫下病毒侵染力可保持數月，在0℃可保持數年。
傳播途徑
介體傳播：
桃蚜（Myzus persicae）和棉蚜（Aphis gossypi）i(Inouye et al., 1967a), 或黃瓜葉片甲蟲不傳毒(Nagai et al., 1974)，帶病殘留物可經土壤傳播至根部(Inouye et al., 1967b; Nagai et al., 1974)，但可以通過溴化甲烷對土壤進行熏蒸而防止病毒的侵染(Inouye et al., 1967c)；植物之間的接觸能進行傳毒。
種傳：
在黃瓜上，種子豐收後一個月種子傳毒效率為8%，保存5個月則下降至1%seed (van Koot & van Dorst, 1959)。種傳也出現在bottlegourd中，在西瓜中高達5%，雖然病毒在種子中不能檢測到(Komuro et al., 1971; Nagai et al., 1974)。種子污染大多是外部因素引起的，並可以通過乾熱處理（70℃處理3天）減輕種子傳毒而不影響種子的發芽率(Fletcher et al., 1969; Nagai et al., 1974)。
菟絲子傳：
黃瓜綠色斑駁花葉病毒可以經Cuscuta subinclusa, 啤酒花菟絲子（C. lupuliformis）和C. campestris傳毒(Schmelzer, 1956),，黃瓜桃葉珊瑚花葉病毒可經C. campestris傳毒(Johnson, 1941).
檢測方法
田間調查時，主要檢查葉片、果梗、果實，觀察是否出現病毒危害症狀。實驗室檢測常用生物學鑑定（莧色藜－枯斑反應）、血清學鑑定、分子生物學鑑定（PCR擴增、核酸斑點雜交製備）、電鏡法進行檢測。
檢疫防治
對CGMMV 的防治同其他病害一樣, 最根本的要使用無侵染的種苗; 在農事操作中儘量避免病毒經器械等傳播, 加強栽培管理, 及時拔除初侵染病株, 銷毀病株殘體。
1.檢疫處置：拔除病株並集中銷毀、土壤消毒和輪作等, 採取這些措施後一般可認為已完成了疫情的處置。其中國內研究表明經焚燒深埋10 個月後的土壤或病殘體樣本仍可能被檢測到CGMMV 核酸的存在, 但已無侵染活性。
2.種子處理：根據國內對帶毒砧木進行藥劑消毒、乾熱處理、乾熱處理結合藥劑消毒、溫湯浸種、溫湯浸種結合藥劑消毒等五種種子處理方法的研究：其中乾熱處理結合藥劑消毒的防效最好, 為100%, 發芽率85.2% , 明顯優於其他處理及對照; 其次是乾熱處理（40C、24h後72C、72h）,防效為93. 46%，發芽率85.6%；溫湯浸種結合藥劑消毒，防效為80. 47%，發芽率87.8%；藥劑消毒（10%磷酸三鈉溶液浸泡20~ 30min），防效為73. 93%，發芽率90.3%；溫湯浸種（55C，1min），防效為58. 20%，發芽率93.7%。
3.抗病育種：選育抗病品種是行之有效的途徑， Visser 等通過Cucumis angur ia L. 和C. z eyheri Sond 種間雜交選育抗病品種；Daryono 等採用RAPD 技術對melon 栽培品種的抗CGMMV 基因進行標記， 進行抗病育種；More 等已育成甜瓜抗病品種VRM5 -10， VRM29- 1， VRM31- 1， VRM31- 2， VRM42- 4 and VRM43- 6。 4.生物防治：許多生物防治研究已開展， Motoyoshi 等採用弱毒株系( SH33b) 對甜瓜進行互動保護試驗； 黃細心Boer havia dif f usa 根部提取物或分離的糖蛋白可防治CGMM- V 在甜瓜上的侵染 ；Pseuderanthemum bicolor 葉片水提取物可防治CGMMV 在Cucumis melo var . momordica 上的侵染；葉子花葉片水提取物也可防治CGMMV 在西紅柿、甜瓜和菽麻等一些重要經濟植物上的侵染；商陸丙酮提取物、KR- 070( 一種菌類多聚糖) 、麥仙翁提取物對防治CGMMV 都有效果；將13 種厥類植物的提取液在Cucur bita p epo cv . Caserta 上進行體外抑制CGMMV活性試驗，最高抑制率可達90%。
危害情況
在黃瓜(Cucumis sativus)上產生的典型症狀為葉片上出現色斑，水泡及變形，植株矮化，產量損失達15%(Fletcher et al., 1969)；受感染的果實通常沒有症狀，但有些株系能夠使果實導致嚴重的色斑和變形 (Inouye et al., 1967a)，有些亞洲株系在葉片上並不出現症狀但是卻能造成產量下降(Smith, 1957).。
桃葉珊瑚花葉病毒侵染黃瓜產生葉片亮黃斑駁，新葉微有變形和矮化；果實出現黃化或出現銀白色的條紋斑，特別是在高溫下容易出現這種症狀(Komuro et al., 1971)。
在西瓜上(Citrullus vulgaris)葉片只產生輕微的斑紋和矮化，但在果實中卻造成嚴重的變色或使果實內部造成腐爛。
