鹽黴素抑制骨肉瘤細胞的作用機制研究及靶向增敏

《鹽黴素抑制骨肉瘤細胞的作用機制研究及靶向增敏》是依託蘇州大學，由朱倫慶擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：鹽黴素抑制骨肉瘤細胞的作用機制研究及靶向增敏
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：朱倫慶
• 依託單位：蘇州大學

項目摘要

尋找有效的化學藥物治療復發性及耐受性骨肉瘤（OS）是目前OS研究的熱點。預實驗結果顯示鹽黴素（Salinomycin）顯著抑制OS細胞存活，並誘導OS細胞凋亡和自噬。機制方面：在OS細胞中，鹽黴素誘導ROS生成、線粒體通道mPTP開放、細胞色素C釋放，並激活JNK和AMPK信號。而抑制AMPK則顯著降低鹽黴素誘導的OS細胞自噬，並增加OS細胞凋亡。因此，我們提出鹽黴素誘導的AMPK活化，後者作為負反饋調節因子抑制OS細胞凋亡；而且通過干預AMPK信號通路可增加OS細胞對鹽黴素的敏感性。本項目中我們將體內、外系統觀察鹽黴素誘導的抗OS作用，解析其作用機制，明確ROS生成、mPTP開放及JNK激活等在其中的作用；闡明鹽黴素激活AMPK-自噬通路與OS細胞凋亡的關係，並通過調節AMPK-自噬通路增敏鹽黴素；明確鹽黴素誘導AMPK活化的分子機制及下游靶點。旨在為OS治療學的突破進行有益探索。

結題摘要

骨肉瘤是最常見的原發性骨惡性腫瘤，尋找更加有效的化療藥物治療復發性及轉移性惡性骨肉瘤迫在眉睫。申請者前期研究結果證實，鹽黴素能顯著抑制OS細胞的存活，並誘導癌細胞周期停滯和凋亡。DNA-PKcs作為骨肉瘤細胞中鹽黴素的主要抗性因子，DNA-PKcs抑制劑（NU7026，NU7441和LY294002）或DNA-PKcs shRNA敲除後，可顯著增強鹽黴素誘導的死亡和細胞凋亡（U2OS和MG-63骨肉瘤細胞系）。microRNA-101的強制表達下調DNA-PKcs後，可增敏鹽黴素抗骨肉瘤細胞的作用；而DNA-PKcs過度表達後，則抑制鹽黴素對骨肉瘤細胞的毒性作用。機制研究結果顯示，DNA-PKcs是鹽黴素誘導促生存自噬活動所必需的。DNA-PKcs抑制劑、DNA-PKcs shRNA干擾以及miR-101表達均可抑制鹽黴素誘導的Beclin1表達和自噬發生，同時Beclin1 shRNA增敏鹽黴素誘導的抗骨肉瘤細胞的作用。在體實驗研究顯示，鹽黴素給藥後，U2OS移植瘤的在體生長受到抑制，與DNA-PKcs聯合用藥後，其抗腫瘤活性明顯增強。DNA-PKcs抑制劑或沉默DNA-PKcs後可增敏鹽黴素抗骨肉瘤細胞的作用。