《魷魚墨多糖促進腸道sIgA分泌的分子機理研究》是依託中國海洋大學，由唐慶娟擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：魷魚墨多糖促進腸道sIgA分泌的分子機理研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：唐慶娟
- 依託單位：中國海洋大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
本項目以魷魚墨多糖為實驗材料，以免疫功能低下小鼠和三維細胞為實驗模型，探討魷魚墨多糖促進腸道sIgA分泌的分子機制。主要內容包括：1、採用免疫組織化學染色和RT-PCR等方法，對小鼠小腸組織中sIgA各組分的表達量進行檢測，探討魷魚墨多糖對腸道sIgA合成的影響。2、構建高表達人多聚免疫球蛋白受體（polymeric Ig receptor，pIgR）的犬腎上皮細胞株和三維細胞模型，採用免疫螢光雙標記、雷射共聚焦斷層掃描等技術，對pIgR的細胞膜定位和穿胞轉運功能進行研究，探討魷魚墨多糖對sIgA分泌過程的影響。闡明魷魚墨多糖促進腸道sIgA分泌的分子機理，將為開發以魷魚墨多糖為功效因子的保健食品提供理論依據。不僅能為腸道sIgA缺乏患者帶來福音，而且將促進我國魷魚墨資源的高值化利用，具有重要的社會效益和經濟價值。
結題摘要
分泌型IgA（sIgA）在腸道黏膜表面形成重要的免疫保護層，是腸道免疫屏障的主要效應因子。尋找促進腸道sIgA分泌的活性物質，預防和治療sIgA缺乏所致的疾病，是近年來藥理學、中藥學、食品營養學等研究領域的熱點之一。本項目在成功建立免疫功能低下小鼠和三維細胞實驗模型基礎上，以魷魚墨多糖為實驗材料，首次深入探討了魷魚墨多糖促進腸道sIgA分泌的分子機制。主要研究內容包括：1、以環磷醯胺腹腔注射模擬化療藥物損傷，構建了腸黏膜免疫低下小鼠模型，研究了魷魚墨多糖對小鼠腸道sIgA分泌量的影響。採用免疫組織化學染色、RT-PCR、western blot等方法，對小鼠小腸組織中sIgA各組分的表達量進行了檢測，發現魷魚墨多糖可以顯著提高腸黏膜sIgA的分泌量，其作用機制與魷魚墨多糖促進了IgA、J chain、pIgR的表達量提高密切相關。2、在構建人多聚免疫球蛋白受體（polymeric Ig receptor，pIgR）質粒的基礎上，通過真核細胞基因轉染，成功構建了高表達人pIgR的犬腎上皮細胞株和三維細胞模型。採用免疫螢光雙標記、雷射共聚焦斷層掃描等技術，對pIgR的細胞膜定位和穿胞轉運功能進行了研究，並且探討了魷魚墨多糖對上皮細胞轉運分泌sIgA速率的影響。研究過程中，成功從多發性骨髓瘤病人血清中分離出dIgA作為三維細胞轉運的底物。通過三維培養技術成功實現pIgR表達定位於MDCK細胞基底側，並且具有轉運dIgA的生物功能。進一步研究發現魷魚墨多糖對上皮細胞穿胞轉運dIgA並且分泌sIgA的速率無顯著影響。研究結果表明，魷魚墨多糖可以顯著提高腸黏膜sIgA分泌量從而改善應激動物的腸道黏膜免疫。魷魚墨多糖促進sIgA分泌的作用主要依賴於調節機體免疫細胞的功能及細胞因子的表達量，對腸道上皮細胞轉運dIgA的速率無顯著影響。本研究闡明了魷魚墨多糖促進腸道sIgA分泌的分子機理，為開發以魷魚墨多糖為功效因子的保健食品提供了理論依據，為腸道sIgA分泌量降低的患者帶來了福音。本項目執行過程中，課題組成員參加相關國際學術會議2人次。目前有6名碩士研究生和1名博士研究生從事課題相關研究，2013年6月有1名碩士研究生畢業，另外1名碩士研究生預計2014年6月畢業。已發表相關SCI收錄論文5篇，中文文章5篇。目前尚有2篇英文文章處於審稿中。
