體外轉錄法

轉錄通常發生在生物體內，如果我們將含有RNA轉錄酶、NTP等條件，在體外無細胞系統中，用DNA作為模板，模仿體內轉錄過程後生成RNA，這樣的技術則能夠控制轉錄的基因、轉錄的過程和轉錄後RNA的用途，該方法被稱為體外轉錄法。

轉錄模板必須滿足:1. 在基因組全長克隆過程中，在正向引物5/ 端添加T7啟動子序列;2. 以T7啟動子作為體外轉錄啟動子，在啟動子後面靶位序列連續帶有3個G,轉錄效率最 高;3. 在正向引物5/端添加一個帽子G,有利於提高體外轉錄RNA分子的侵染活性。