革蘭氏菌

通過革蘭氏染色法，能夠把細菌分為兩大類：採用這種染色方法，是先用龍膽紫（亦稱結晶紫）來染病菌，所有細菌都染成了紫色，然後再塗以革蘭氏碘液，來加強染料與菌體的結合，再用95%的酒精來脫色20～30秒鐘，有些細菌不被脫色，仍保留紫色，有些細菌被脫色變成無色，最後再用復紅或沙黃復染1分鐘，結果已被脫色的細菌被染成紅色，未脫色的細菌仍然保持紫色，不再著色，這樣，凡被染成紫色的細菌稱為革蘭氏陽性菌(G﹢菌)；染成紅色的稱為革蘭氏陰性菌（Gˉ菌）。

基本介紹

• 中文名：革蘭氏菌
• 分類：革蘭氏陰性菌，革蘭氏陰性菌
• 方法：革蘭氏染色法
• 染色效果：取決於細菌細胞壁的結構
• 原理學說：等電點學說、化學學說和滲透學說
• 步驟：初染、媒染、脫色和復染

革蘭氏染色

自然界存在多種多樣病菌，如何將這些病菌加以鑑別、分類，並選擇有效藥物進行治療這是很重要的問題。革蘭氏染色法的意義就在於鑑別細菌，把眾多的細菌分為兩大類，革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌。大多數化膿性球菌都屬於革蘭氏陽性菌，它們能產生外毒素使人致病，而大多數腸道菌多屬於革蘭氏陰性菌，它們產生內毒素，靠內毒素使人致病。

革蘭氏陰性菌(Gˉ菌)。

常見種類：

常見的革蘭氏陽性菌有：葡萄球菌、鏈球菌、肺炎雙球菌、炭疽桿菌、白喉桿菌、破傷風桿菌等。

常見的革蘭氏陰性菌有：痢疾桿菌、傷寒桿菌、大腸桿菌、變形桿菌、綠膿桿菌、百日咳桿菌、霍亂弧菌及腦膜炎雙球菌等。在治療上，大多數革蘭氏陽性菌都對青黴素敏感（結核桿菌對青黴素不敏感），而革蘭氏陰性菌則對青黴素不敏感（但奈瑟氏菌中的流行性腦膜炎雙球菌和淋病雙球菌對青黴素敏感），而對鏈黴素、氯黴素等敏感。所以首先區分病原菌是革蘭氏陽性菌還是陰性菌，在選擇抗生素方面意義重大。

革蘭氏染色原理

革蘭氏染色的結果取決於細菌細胞壁的結構：

G﹢菌：細胞壁厚，肽聚糖網狀分子形成一種透性障，當乙醇脫色時，肽聚糖脫水而孔障縮小，故保留結晶紫-碘複合物在細胞膜上。呈紫色。

Gˉ菌：肽聚糖層薄，交聯鬆散，乙醇脫色不能使其結構收縮，其脂含量高,乙醇將脂溶解，縫隙加大，結晶紫-碘複合物溶出細胞壁，沙黃復染後呈紅色。

革蘭氏陽性菌細胞壁厚約20-80nm，有15-50層肽聚糖片層，含20-40%的磷壁酸。革蘭氏陰性菌細胞壁厚約10nm，僅2-3層肽聚糖，另外還有脂多糖、細菌外膜和脂蛋白。

革蘭氏染色原理目前有三種觀點：等電點學說、化學學說和滲透學說。

1． 等電點學說，革蘭氏陽性菌的等電點在PH2-3，比陰性菌（PH4-5）低，加之碘為弱氧化劑，可降低革蘭氏陽性菌的等電點，致使兩類菌的等電點差異擴大，因此陽性菌和鹼性染料的結合力比陰性菌更強。

2．化學學說，碘液在菌體內與結晶紫結合後又和菌體核心糖核酸鎂鹽-蛋白質複合物結合，此結合物不易被丙酮酒精脫掉，呈革蘭氏染色陽性。因革蘭氏陰性菌缺乏核糖核酸鎂鹽，故對碘與結晶紫結合物攝取少，且不牢固，易被丙酮酒精脫色而呈革蘭氏染色陰性。

3．滲透學說，乙醇使陽性菌所含粘肽多糖脫水而致細胞壁間隙縮小，通透性降低，在菌體內保留了染料-碘複合物，呈紫色。陰性菌含粘肽少，細胞壁變化不大，通透性不受影響，菌體內的染料-碘複合物較易透出，失去紫色，被復染成為紅色。

革蘭氏染色步驟

操作分初染、媒染、脫色和復染四步

革蘭氏染色步驟示意圖