靈芝多糖

靈芝多糖

靈芝多糖是多孔菌科靈芝屬真菌菌絲體的次生代謝產物,存在於靈芝屬真菌的菌絲體和子實體中。靈芝子實體粉碎加入少量培養基發酵,發酵後原料離心,上清液低溫真空濃縮,透析,乙醇沉澱,丙酮洗滌,除蛋白,噴霧乾燥,最後加入10%水提乾粉混合而成。靈芝多糖為淺棕色至棕褐色粉末,可溶於熱水。

基本介紹

  • 中文名:靈芝多糖
  • 外文名:Ganoderma lucidum Polysaccharide)
  • 構成:三股單糖鏈
  • 屬性:靈芝的最有效成分之一
  • 種數:200多種
相關背景,理化性質,功能,套用,靈芝多糖提取,特性,

相關背景

靈芝多糖是由三股單糖鏈構成的、具有螺旋狀立體構形 (三級結構) 的葡聚糖,其立體構形與脫氧核糖核酸 (DNA) 、核糖核酸 (RNA) 相似,是一種大分子化合物,其分子量從數千到數十萬,它是一種從靈芝孢子粉或靈芝中提取的物質。不溶於高濃度的酒精,微溶於低濃度的酒精及冷水,在熱水中能全部溶解。靈芝多糖都存在於靈芝的細胞壁內壁。靈芝多糖中除含有葡萄糖外,大多還含有阿拉伯糖、木糖、半乳糖、岩藻糖、甘露糖、鼠李糖等單糖,但含量較少。單糖間糖苷鍵連線有 1,3、 1,4 和 1,6 數種。大多為β型結構,少數為α -型結構。α -型多糖沒有藥理活性(藥效)。多數多糖鏈有分支,部分多糖鏈含有小分子膚鏈。多糖鏈分枝密度高或含有膚鏈的其藥理活性也高。靈芝多糖在水溶液中多糖鏈一般由三股糖鏈組成,在 o. 1 摩 / 升氫氧化納溶液中時多糖鏈的三股糖鏈離解為單股單糖鏈。
靈芝多糖靈芝多糖
多糖的藥理活性與單糖間糖苷鍵的結合形式有關。單糖間以β- 1,3 、 1,6 或β-1,4 、 1,6-糖苷鍵連線是有效的即具有藥理活性,而純 β-1,4- 糖背鍵連線的則沒有藥理活性。此外,多糖的藥理活性還與其立體構形有關,若螺旋形立體結構被破壞,其活性則大大下降。澱粉、纖維素、糊精也是多糖,但其構形與靈芝多糖 (或其他真菌多糖) 不同。澱粉、纖維素等多糖沒有螺旋形立體結構,單糖間的連線全是β- 1,4-連線。纖維素是 β-型多糖,澱粉、糊精是α -型多糖。由於其構形不同,所以澱粉、糊精、纖維素都沒有藥理活性。
靈芝多糖是靈芝的最有效成分之一,因此,也特別受到藥科技工作者的重視,對它的研究報導也最多。已分離到的靈芝多糖有 200 多種,其中有數十種的結構已被搞清,分子量已被測定。
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靈芝多糖有多方面的藥理活性 : 能提高機體免疫力,加速血液微循環,提高血液供氧能力,降低機體靜止狀態下的無效耗氧量,消除體內自由基,提高機體細胞膜的封閉度,抗放射,提高肝臟、骨髓、血液合成 DNA,RNA,蛋白質的能力,延長 壽命等。靈芝的多種藥理活性大多和靈芝多糖有關。

理化性質

靈芝多糖的生物活性與單糖的連線方式、分枝度及支鏈上羥基取代數量、提取劑、多糖中單糖組成和相對分子質量等有關。靈芝多糖是以β-(1→3),β-(1→6)連線或者以β-(1→3),β-(1→4)連線的,且相對分子質量在1×104以上才有生物活性,分枝度高的多糖具有很高的抑癌活性。

功能

降血糖,降血脂,抗血栓,抗氧化,清除自由基,抗衰老,抗輻射,抗腫瘤,促進血流循環,調節免疫,調節核酸、蛋白質代謝,促進DNA合成,促進人體臍血LAK細胞增殖。

套用

由於靈芝多糖具有特有的生理活性和臨床作用,且安全無毒,可廣泛套用於醫藥、食品和化妝品行業。基於靈芝多糖可提高機體免疫力,在癌症病人經放療、化療機體免疫力受損的情況下,與放療、化療配合可達到治癒疾病的目的。另外,靈芝多糖還可抑制過敏反應介質的釋放,從而阻斷非特異性反應的發生,因此又可抑制手術後癌細胞復發和轉移。已投入使用的靈芝製劑有片劑、針劑、沖劑、口服液、糖漿劑和酒劑等,均取得了一定的臨床療效。靈芝多糖作為功能因子可製成保健食品,也可作為食品添加劑加入飲料、糕點、口服液中,這些都極大地豐富了食品市場。由於靈芝多糖具有抗自由基的功效,可用於化妝品中起延緩衰老的作用。

靈芝多糖提取

靈芝菌絲體多糖的提取
(一)材料
⒈菌種:湖南省食用菌研究所提供的韓國靈芝母種。
⒉種子培養基:玉米粉2% 大米粉2%
蔗糖2% 磷酸二氫鉀o.1g
硫酸鎂0.05% ph值自然
⒊發酵培養基:麥麩浸出液10% 葡萄糖2%
硫酸銨0.2%
磷酸二氫鉀0.2% ph值自然
(二)方法 1.種子培養:
⒉發酵培養生產菌絲體。
⒊測定乾、濕菌絲體。
將發酵液進行離心,然後取其沉澱物,加人60%蔗糖,進行高速(3000轉/分)密度梯度離心5分鐘,取上層菌絲體,洗淨蔗糖再壓乾,即得濕菌體,然後再將濕菌體於高溫下烘乾即為乾菌體。分別稱取其重量。
⒋多糖的提取。
菌絲體預處理。取適量的靈芝濕菌體,用乙醇等有機溶劑進行處理,以除去濕菌體中的脂類物質,同時使糖苷酶失去活性,防止多糖的降解。
⑵用熱水提取多糖。取上面經預處理的靈芝濕菌體,放人1:20的熱水(95℃)中浸提,一次3小時,連續浸提3次,合併3次的水浸提液減壓、濃縮至一定體積,再用3倍體積的95%乙醇混合,靜置10-12小時,再離心,最後加入75%的乙醇反覆洗滌,以沉澱多糖。此沉澱物為粗多糖,其中混雜有蛋白質、色素、低聚糖等小分子雜質,一般要經過純化。
⑶多糖的純化,去蛋白質和deae纖維素柱層析。去蛋白質一般採用sevag法:加入0.2倍多糖溶液體積的氯仿和0.04倍體積的正丁醇混合振盪半小時進行分離,直至氯仿與水的界面無沉澱為止,且要重複處理2-3次才能有效除去多糖中的蛋白質。多糖純化一般採用硼酸型deae纖維素柱層析法:取脫蛋白後的多糖,分別以0.025mol/l、0.1mol/l的硼砂,0.1mol/l的氫氧化鈉溶液進行洗脫,然後用0.2%恿銅硫酸液比色測定吸收度,收集有多糖的洗脫液,再濃縮脫鹽即得所需的多糖。
⑷多糖純度的鑑定。
可用電泳法進行鑑定,如果存在單一帶,說明為純多糖。
⒌多糖與多糖中蛋白質含量的測定:
取一定量菌絲體粗多糖,加水煮沸溶解,用sevag方法脫去蛋白考馬斯亮蘭法測其粗多糖中蛋白質和多糖的含量。測得菌絲體中粗多糖含17.01%、多糖含5.43%、蛋白質含量2.16%。
靈芝子實體多糖的提取
(一)材料 1.菌種:韓國靈芝栽培種。
⒉子實體栽培生產料:木屑78%,米糠20%,蔗糖1%,
石膏1%,ph值自然。
(二)方法
⒈子實體栽培。
⒉靈芝子實體預處理。
⒊子實體多糖的提取。
取適量的靈芝子實體,搗碎成粉末,用80目篩過篩,然後用熱水提取法進行提取。具體操作同菌絲體多糖的提取。提取出的粗多糖含有色素、蛋白質等小分子雜質,也須除去。
⒋去除蛋白質和色素。
子實體粗多糖去除蛋白質也採用se陰法。去除色素,目前尚未發現很理想的方法。一般用乙醇進行反覆沖洗,但效果不很理想。
⒌多糖純度的鑑定。
同菌絲體多糖純度的鑑定。
⒍子實體粗多糖、多糖及蛋白質含量的測定。
具體方法同菌絲體多糖及蛋白質含量的測定。測得子實體中粗多糖7.5%、多糖1.5%,蛋白質0.6%,其含量均低於菌絲體中的含量。可見菌絲體階段就形成了靈芝多糖的有效成分,為靈芝液體深層發酵生產菌絲體提供了科學依據。

特性

靈芝多糖由三股單糖鏈構成,其構型與DNA、RNA相似,是一種螺旋狀立體構型物,螺旋層之間主要以氫鍵固定。靈芝多糖在單糖組成、糖苷鍵構型、分子量、旋光度、溶解度等某些理化性質方面存在顯著差異。在已提取到的有200多種靈芝多糖中,大多數是異多糖,即除含有葡萄糖外,還含有半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、鼠李糖等其它單糖;由於來源不同,分子量可從數萬到數十萬不等,多數伴有分支,部分多糖還含有肽鏈。
靈芝多糖體對溫度很敏感,是熱敏性物質,大多不溶於高濃度酒精,而溶於熱水。溫度升高,會引起靈芝多糖的降解,多糖體中糖苷鍵易斷裂而形成多個唐單體,而唐單體是沒有活性的。現今提取靈芝多糖多採用膜分離法,整個過程在密閉系統中進行,無需加熱,避免和減輕了熱和氧對靈芝多糖營養成分的影響。
靈芝結構緊密,具有較好的維持力,靈芝多糖存在於細胞壁內,較難滲出。研究人員利用超音波高頻振蕩產生“空化效應”能破靈芝結構的維持力,是靈芝的結構層發生變化,擴大透析膜徑,使細胞壁上的多糖儘快釋放。
【性狀】本品為棕褐色或棕黃色粉末,易吸濕 ,易溶於水
【重金屬指標】As<0.3ppm Cd<0.5ppm Pb<1.0ppm Hg<0.2ppm
【衛生指標】 細菌數 < 1000個/g 大腸桿菌、活蟎不得檢出黴菌數 < 100個/g 乾燥失重 ≤9%。
【多糖含量】10%-40%。

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