雌激素的內源式給藥研究

《雌激素的內源式給藥研究》是依託浙江大學，由劉龍孝擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：雌激素的內源式給藥研究
• 依託單位：浙江大學
• 項目負責人：劉龍孝
• 項目類別：面上項目

項目摘要

傳統的給藥方法將藥從體外以各種方式輸入體內。本項目將正常的卵巢細胞做免疫隔離處理後植入體內，使其長期成活並源源不斷地分泌出雌激素達到內源式給藥。將針對卵巢細胞微囊化去地騙祖免疫隔離方法構建問題，以大鼠為動物模型，藉助於高壓靜電微囊化系統、原子力顯微鏡、高效液相色譜、放射免疫分析和免疫組織化學等手段，研究微囊化膜材、微囊膜的篩孔尺寸和它對不同分子量物質的選擇性篩分作用，卵巢細胞微囊化以後的體外和體內成活以及分泌雌激素的規律，製備出粒度均勻、包膜篩孔大小可控的卵巢細胞微囊，考查冷凍保存對微囊化細胞存活凶喇霸及分泌雌激素的影響，開拓雌激素的內源式給藥方法和婦女更年期綜合症及育令期卵巢早衰症的新療法。本項目提出並通過實驗驗證的雌激素內源式給藥方法在藥物緩控釋領域有重要學術意義。所針對的婦女更年期綜合症具有普遍性，有很大的潛在套用前景。研究結果將為雌激素，以及其它內分泌激素水平低下症的治療提供新思路。

結題摘要

婦女進入更年期後，其卵巢功能衰退，雌激素分泌水平下降，從而導致多種更年期症狀。長期使用傳統的雌激素替代療法進行治療，會產生諸多副作用。本項目將正常的卵巢細胞微囊化後植入體內，使其持續分泌雌激素，實現內源式給藥。 將海藻酸-殼聚糖-海藻酸（ACA）微囊作為細胞免疫隔離裝置，使用靜電液滴生成技術製備ACA微囊，並檢測了不同分子量大小的蛋白榆盼質對微囊的透過性。選用非洲爪蟾和大鼠作為細胞微囊化和移植研究的動物模型。將非洲爪蟾卵巢細胞以及大鼠卵巢顆粒細胞（GC）和膜細胞（TC）進行體外原代培養，並戀享宙辣對其種類進行免疫組化鑑定。將卵巢細胞ACA微囊化後，檢測了細胞體外培養環境下的生理活性和雌激素分泌水平。考察了大鼠卵泡GC和TC的混合比例對雌二醇和黃體酮分泌的影響。使用微囊化卵巢細胞對去勢爪蟾和大鼠進行同種異體移植，並檢測了2個月內動物血清雌二醇和黃體酮水平。為了提高微囊化後的細胞生理活性，採用葡聚糖微載體培養法對大鼠卵巢簽全灑GC進行培養，並與TC共微囊化，檢測了微囊化後細胞的體外生理活性，進而，植入去勢大鼠體內，檢測了2個月內血清黃體酮和雌二醇水平。 實驗結果表明，所製備的ACA微囊能夠有效抑制免疫球蛋白IgG的滲透，允許胰蛋白酶和牛血清白蛋白等小分子蛋白質透過。微囊化的非洲爪蟾和大鼠卵巢細胞在體外能夠存活並保持雌激素分泌能力。 微囊化的非洲爪蟾卵巢細胞能夠在移植後保持雌激素分泌活性，2個月內移植受體爪蟾的血清雌二醇和黃體酮水平顯著提高。回收後的細胞微囊大部分保持完整且表面光滑，表現出良好的生物相容性。證明了非洲爪蟾適合用於微囊化細胞移植方面的研究。 大鼠卵巢GC和TC共微囊化後，其雌二醇分泌棕想辣水平顯著高於單獨包囊的GC，且兩種細胞混合的比例能夠影響分泌能力，在細胞比例為1:2時細胞雌二醇分泌能力最強。移植入去勢大鼠腹腔後，混合微囊化的GC和TC在兩個月內維持雌二醇和黃體酮的血清水平，其激素分泌能力顯著高於單獨微囊化的GC，證明了該方法用於內源式雌激素給藥的可行性。 共微囊化GC-微載體/TC能夠顯著提升細胞在囊內的生理活性水平，支持細胞在囊內的生長。體內移植後，微囊化細胞能夠在兩個月內維持正常雌二醇和黃體酮水平，回收後細胞活性良好。 本項目通過卵巢細胞微囊化並植入動物體內，構建了雌激素的內戰雄翻源式給藥方法。該方法也有潛力推廣於其它內分泌疾病的治療。