長鏈非編碼RNA CAR intergenic 10在細胞衰老中的作用和機制

《長鏈非編碼RNA CAR intergenic 10在細胞衰老中的作用和機制》是依託山東大學，由張錫宇擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：長鏈非編碼RNA CAR intergenic 10在細胞衰老中的作用和機制
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：張錫宇
• 依託單位：山東大學

中文摘要

衰老是老年性疾病發生的主要原因之一，已有研究表明長鏈非編碼RNA（lncRNAs）參與調控細胞衰老進程。課題組前期對複製性衰老和氧化應激早熟性衰老的人成纖維細胞（NHF）進行了lncRNA晶片分析，lncRNA CAR intergenic 10是我們從晶片中篩選出的在兩種衰老方式中均低表達的lncRNA，初步功能實驗顯示lncRNA CAR 10可延緩NHF細胞衰老，但具體作用機制尚待深入探討。本課題擬採用逆轉錄病毒表達載體及siRNA干擾技術確定lncRNA CAR 10在NHF細胞衰老中的功能；利用RNA-pulldown、RNA-RIP等技術結合蛋白質譜等手段篩選、鑑定lncRNA CAR 10直接結合的蛋白分子及可能調控的靶基因；闡明CAR 10調控細胞衰老的下游通路和分子機制。本研究從lncRNA角度闡述細胞衰老的分子機制,將為延緩並減少老年性疾病的發生提供重要依據。

結題摘要

長鏈非編碼RNAs（lncRNAs）是一類具有重要調控功能的分子，能從表觀遺傳修飾、轉錄及轉錄後等水平參與胚胎髮育、細胞分化和衰老等生命過程的調控。 衰老是老年性疾病發生的主要原因之一，已有研究表明長鏈非編碼RNA（lncRNAs）參與調控細胞衰老進程。課題組對複製性衰老和氧化應激早熟性衰老的人成纖維細胞（NHF）進行了lncRNA晶片分析，lncRNA CAR intergenic 10是我們從晶片中篩選出的在兩種衰老方式中均低表達的lncRNA，而lncRNA BC042152是在兩種衰老方式中均高表達的一種lncRNA。敲低CAR 10的NHF細胞存活率顯著降低，表明lncRNA CAR 10可延緩NHF細胞衰老。lncRNA CAR 10基因與其附近的ADAM12基因有部分序列重疊，在siRNA干擾CAR 10表達的NHF細胞中，ADAM12基因的表達量也隨之下調，提示ADAM12基因在細胞衰老過程中可能也起到一定的作用。lncRNA BC042152與其附近的POU2F2基因以頭-頭相接的方式存在於第19號染色體，二者轉錄起始點之間間距僅僅218bp。這兩個基因共享一組雙向的（bi-directional）啟動子序列，在衰老的NHF細胞中lncRNA BC042152和POU2F2均高表達。 研究表明非編碼RNA（ncRNAs）在腫瘤發生髮展中起重要的調控作用。我們在高級別漿液性卵巢癌中發現非編碼RNA miR-130a和PVT1顯著高表達。我們的研究表明，miR-130a通過靶向抑制TSC1表達，激活mTOR信號通路，進而增強卵巢癌細胞增殖、克隆形成、侵襲能力並促進EMT過程。長鏈非編碼RNA PVT1編碼產生的三個miRNAs（miR-1204、miR-1205和miR-1206）可促進卵巢癌細胞的增殖、克隆形成能力及侵襲能力；PVT1還可能通過ceRNA機制發揮生物學功能。 本項研究將為深入理解非編碼RNAs在細胞衰老和腫瘤發生髮展過程中的分子機制、尋找理想的藥物靶點提供理論和實驗基礎。