《長效β2受體激動劑支氣管保護作用耐受機制的實驗研究》是依託四川大學，由劉春濤擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：長效β2受體激動劑支氣管保護作用耐受機制的實驗研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：劉春濤
- 依託單位：四川大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
長效β2受體激動劑（LABA）長期使用後其支氣管保護作用出現耐受，是臨床療效下降的重要原因，LABA聯合吸入性糖皮質激素（ICS）不能完全逆轉這一現象。闡明支氣管保護作用耐受的機制並探討防治措施，對於提高療效、減少不良反應甚為必要。本試驗採用大鼠哮喘模型進行體外氣道平滑肌原代培養和體內實驗，採用Western blot、放射免疫法、放射配基結合實驗等技術，進一步證實長期使用LABA或ICS/LABA可能出現支氣管保護作用的耐受，試圖了解耐受現象是否與β2受體及Gs-cAMP-PKA通路過度激活，進而上調Gq偶聯受體及Gq-PLC-IP3信號通路有關；抑制磷脂酶C，或通過β受體阻滯劑對抗β2受體過度激活，是否能夠調節Gq偶聯受體及Gq-PLC-IP3及β2AR-cAMP-PKA信號通路的活性，從而延緩或逆轉LABA或ICS/LABA的支氣管保護作用的耐受現象。
結題摘要
本課題通過體外細胞培養、動物模型體內實驗和哮喘患者臨床試驗，發現：（1）長效β2AR激動劑福莫特羅通過上調M3R蛋白，活化Gq偶聯受體-PLCβ1-IP3信號通路，表明β2AR-cAMP通路和Gq-PLCβ1-IP3通路存在串話，可能是其支氣管保護作用產生耐受的機制之一。（2）糖皮質激素及PLC拮抗劑與福莫特羅聯用，通過抑制M3R上調，有可能防止支氣管保護作用的耐受。（3）β2AR拮抗劑ICI118,551能夠以濃度和時間依賴方式抑制氣道平滑肌Gq偶聯受體M3R的表達，減少乙醯膽鹼誘導的IP3產生，其作用與LABA/糖皮質激素聯用效應相當，提示β2AR反向激動劑可能具有與ICS類似的支氣管保護作用。（4）福莫特羅在上調M3R表達的同時能夠誘導RhoA表達顯著增強，提示RhoA可能是β2AR激動劑耐受作用的另一機制。法舒地爾能部分抑制其表達，法舒地爾聯合布地奈德能顯著抑制RhoA表達。法舒地爾對M3無明顯抑制作用、但其可增強布地奈德的抑制作用。（5）布地奈德/福莫特羅規則治療前12周哮喘患者外周血淋巴細胞β2AR 表達水平逐漸升高，M3R水平逐漸升高，伴有M3R信號通路下游蛋白PLCβ1的水平增加。加用噻托溴銨組β2AR表達水平無明顯變化，M3R表達水平和PLCβ1 蛋白水平逐漸降低，提示噻托溴銨通過拮抗M3R受體，可以抑制β2AR過度激活引起的M3信號通路的上調的機制。鑒於目前尚未有更好的治療方案能夠取代ICS/LABA聯合治療在哮喘維持治療中的地位，而LABA的安全性問題已引起高度關注和廣泛爭議，長期使用LABA的確可引起氣道反應性增高和支氣管保護作用耐受，本研究結果對於闡明長期使用LABA引起氣道反應性增高和支氣管保護作用耐受的機制以及糖皮質激素、PLC抑制劑和β受體阻滯劑的干預作用及其機制，為重新評價LABA在哮喘治療中的地位，合理使用ICS/LABA聯合治療，提高其治療效果，減輕安全性風險，以及探討新的哮喘治療策略，開發新的平喘藥物，將提供重要的實驗依據。
