銀染測驗

銀染測驗是檢測聚丙烯醯胺凝膠中的蛋白質,是銀離子在鹼性pH 環境下被還原成金屬銀,沉澱在蛋白質的表面上顯色的原理。銀染測驗的方法種類很多,目前有文獻報導的就有100多種。但是其準確的染色機制還不是特別地清楚。銀染液和顯色液需要預冷。所用器皿要很潔淨,不用手直接接觸,以免雜蛋白污染!清洗用水儘量用高純度去離子水,蒸餾水更佳,可以減少背景著色。

大致的原理是銀離子在鹼性pH 環境下被還原成金屬銀,沉澱在蛋白質的表面上而顯色。由於銀染測驗的靈敏度很高,可染出膠上低於1 ng/蛋白質點,故廣泛的用在2D 凝膠分析上,及極低蛋白含量測定的垂直凝膠中。1.固定時間較長,則加一步水洗30min,以免膠太脆而破碎。2.甲醛在使用前加入。3.最好多配製一份顯色液,第一次顯色到溶液變混濁時換一份顯色液,顯色到點清晰。4.顯色過程很快,要注意把握時間,避免染色過度。

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