重組蛋白分離與分析

《重組蛋白分離與分析》是一部科普書籍，作者是范代娣，由化學工業出版社出版。

基本介紹

• 中文名：重組蛋白分離與分析
• 作者：范代娣
• 定價： ¥ 28.00 元
• ISBN：7-5025-5846-2 

基本信息

重組蛋白分離與分析

作者： 范代娣、沈立新、朱鈺 定價： ¥ 28.00 元

出版社： 化學工業出版社 出版日期： 2004年09月

ISBN： 7-5025-5846-2 開本： 16 開

類別： 生物化學化工,醫藥農化 頁數： 288 頁

內容簡介

本書結合實際研究中摸索出重組蛋白質的分析和分離方法，詳細介紹了重組蛋白質的不同性質和不同的分離提取技術，介紹了大規模工業化過程中蛋白質的分離技術，包涵體內蛋白質的分離技術，分泌型蛋白質的分離純化技術，胞間質蛋白質的分離純化技術及鑑定手段，對比了各種分離、分析方法之間的優缺點，介紹了如何利用蛋白質工程進行重組蛋白質的修飾以利分離純化和臨床套用。

目錄信息

第1章 重組蛋白分離與分析概論1

11 重組蛋白質概論1

12 重組蛋白質的設計及純化技巧2

13 純化目標5

131 產品的純度和安全性5

132 終產物成本5

14 純化策略6

15 純化過程的放大7

16 對純化的綜合評價8

17 合理設計純化工藝8

主要參考文獻11

第2章 重組蛋白純化的一般工藝及方法14

21 引言14

22 用做純化的主要蛋白質性質14

221 蛋白質大小15

222 蛋白質形狀15

223 蛋白質荷電性15

224 蛋白質等電點16

225 蛋白質疏水性16

226 蛋白質溶解度16

227 蛋白質密度16

228 蛋白質與配體結合能力16

229 蛋白質與金屬螯合能力16

2210 蛋白質的某些特殊性質17

23 純化分離技術18

231 發酵液的預處理18

232 細胞分離技術20

233 細胞破碎技術24

234 生物物質的分離純化技術24

24 純化方案中純化順序的選擇76

25 固定相的選擇77

26 方案的有效性分析78

主要參考文獻79

第3章 細胞破碎的物理及化學方法81

31 前言81

32 破碎率的評價81

33 破碎方法82

331 球磨勻漿法83

332 轉子-定子式勻漿機勻漿87

333 高壓勻漿機勻漿90

334 超音波破碎94

335 其他物理方法95

336 細胞自溶98

337 酶解法101

338 乾燥法102

339 其他化學溶劑法103

3310 細胞滲透法103

3311 通過細胞自身調控體系進行細胞的破碎104

34 總結104

主要參考文獻106

第4章 純化過程中如何防止蛋白水解108

41 天然及變性蛋白的水解108

411 蛋白酶的生化作用108

412 蛋白酶的種類和蛋白酶的作用機理109

413 蛋白酶的特異性及對降解底物的敏感性110

42 用作宿主細胞的真核、原核生物體內的蛋白酶111

421 大腸桿菌 (Ecoli）內的蛋白酶111

422 枯草桿菌 (Bacillus subtilis）產生的蛋白酶112

423 酵母中的蛋白酶113

424 哺乳動物細胞內的蛋白酶115

43 蛋白酶的鑑定116

44 防止重組蛋白水解的策略117

441 基因調控法118

442 去除蛋白酶的策略121

443 抑制蛋白酶的策略122

主要參考文獻125

第5章 從重組蛋白質中除去N末端甲硫氨酸的方法127

51 引言127

511 蛋白質轉譯後的修飾及鑑定分析127

512 甲硫氨酸氨基肽酶的特性131

513 胞質間重組蛋白的加工131

514 與多餘甲硫氨酸相關的非均勻性和免疫原性132

52 去除末端甲硫氨酸的方法133

521 體內去除末端甲硫氨酸的方法133

522 去除末端甲硫氨酸的體外方法135

主要參考文獻137

第6章 藥用蛋白質的純化141

61 引言141

62 蛋白質純化過程中的質量控制142

621 蛋白質生物功效142

622 蛋白質結構143

623 蛋白質純度的測定143

624 終產品中痕量雜質的分析143

63 蛋白質純化準則143

631 初始原料物質的濃度和雜質性質144

632 非蛋白雜質的去除145

633 DNA的去除145

634 熱源的去除147

635 病毒的去除149

636 外源蛋白的去除150

64 方案的有效性151

65 結論152

主要參考文獻153

第7章 利用工程修飾改進重組蛋白的純化分離157

71 引言157

72 引入切割位點的重組工程蛋白158

73 促進活性蛋白分離的工程技術159

731 形成包涵體以穩定蛋白質160

732 基團修飾以利天然活性蛋白質生產162

74 簡化純化工藝的蛋白質工程163

741 改進色譜性能的蛋白質工程164

742 構建工程位點使蛋白質具有免疫親和性能164

743 構建工程位點使蛋白質具有離子交換吸附性能166

744 構建工程位點使蛋白質具有金屬親和吸附性能168

745 低成本純化蛋白工程171

746 改進分析方法的蛋白質工程171

75 結論172

主要參考文獻173

第8章 大腸桿菌表達的重組蛋白的分離純化175

81 引言175

82 大腸桿菌表達的分泌型重組蛋白的純化分離178

821 純化方法179

822 實例180

823 分泌型重組蛋白的純化分離總結199

83 大腸桿菌表達的包涵體蛋白的純化分離200

831 確定包涵體量201

832 重組蛋白穩定性檢測204

833 純化方案206

834 包涵體的組成分析210

835 包涵體的結構214

836 影響包涵體形成的因素214

837 包涵體蛋白純化實例216

838 包涵體蛋白純化總結221

主要參考文獻221

第9章 酵母表達的重組蛋白的分離純化225

91 引論225

92 釀酒酵母或麵包酵母表達的重組蛋白的分離純化227

921 釀酒酵母或麵包酵母表達的胞內蛋白質的分離純化228

922 釀酒酵母或麵包酵母分泌表達的蛋白質的分離純化232

923 結論234

924 釀酒酵母或麵包酵母表達的重組蛋白的研究展望235

93 Pichia pastoris生產的重組蛋白的分離純化235

931 背景235

932 Pichia pastoris表達體系的發展236

933 Ppastoris表達的胞內外源蛋白239

934 Pichia pastoris分泌的外源蛋白的分離純化242

935 討論248

主要參考文獻249

第10章 單克隆抗體的純化252

101 引言252

102 單克隆抗體製備過程253

103 抗體的物理特徵257

104 單克隆抗體純化工藝258

1041 澄清258

1042 沉澱260

1043 分離260

1044 非蛋白雜質的去除271

附錄 鼠源性病毒檢測273

主要參考文獻274