《重組抗HIV雙功能抗體樣融合蛋白的研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由吉昌華擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：重組抗HIV雙功能抗體樣融合蛋白的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：吉昌華
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
- 批准號：39370154
- 申請代碼：C0505
- 負責人職稱：講師
- 研究期限：1994-01-01 至 1996-12-31
- 支持經費：8（萬元）
中文摘要
本研究旨在獲得可介導細胞毒性T淋巴細胞靶向殺傷HIV的雙功能抗體樣融合蛋白。為此經PCR擴增出HIV結合區的人CD4基因（600bp）並在E.coli中表達，表達量為細菌總蛋白的24.8%，純化後，表達產物的純度達92%。另外，在PCR擴增出抗人CD3單抗重、輕鏈可變區基因（Vh、Vl）的基礎上，用重疊延伸PCR法將二者拼接為單鏈抗體（SCFV）基因，對該基因表達產物的活性測定表明，其具有CD3結合活性 ，在此基礎上，採用PCR重疊延伸法構建了CD4-SCFV雙功能融合蛋白基因，DNA序列分析後將其克隆於PGEX-4T-3載體，在E.coli中表達出72KD的GST融合蛋白，酶切獲約48KD的雙功能抗體樣融合蛋白。正進行該融合蛋白分子的活性測定工作。
