酶聯合吸附測定

酶聯免疫吸附試驗 (以下簡稱ELISA) :是酶免疫測定技術中套用最廣的技術。用於檢測包被於固相板孔中的待測抗原(或抗體)。即用酶標記抗體,並將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使抗原抗體反應在固相載體表面進行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除,最後通過酶作用於底物後顯色來判斷結果。

基本介紹

  • 名稱:酶聯合吸附測定
  • 所屬分類:生化檢查
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正常值

待檢血清與已知陰性血清的比值(P/N)<2.1,而且待檢血清的OD值<0.4,則判為陰性。

臨床意義

異常結果:待檢血清與已知陰性血清的比值(P/N)≥2.1,而且待檢血清的OD值≥0.4,則判為陽性。 需要檢查人群:檢測抗原抗體。

注意事項

不適宜人群:無 檢查前禁忌:準備好各種包裝液,並配置好濃度。 檢查時禁忌:(1) 嚴格控制影響標記效率的因素如溫度、時間、pH、酶和抗體量等。 (2) 裝層析柱時要使柱體均勻、柱面平整,無氣泡、裂隙。

檢查過程

常用的 ELISA 法有雙抗體夾心法和間接法,前者用於檢測大分子抗原,後者用於測定特異抗體。 一、間接ELISA 本法主要用於檢測抗體。間接ELISA的操作程式如下。 (1) 材料 ① 包被液、洗滌液、保溫液、底物液、終止液; ② DVH包被抗原、酶標抗抗體、陰性及陽性DVH參考血清. ③ ELISA檢測儀、加樣器、聚苯乙烯微量板。 (2) 方法步驟 ① 加抗原包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋乾 ② 加待檢血清 → 37℃ 2小時,洗滌三次、拋乾 ③ 加酶標抗體 → 37℃ 2小時,洗滌三次、拋乾 ④ 加底物液 → 37℃ 30分鐘,加終止液 ⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值,並計算出P/N比值。 二、雙抗體夾心ELISA 本法主要用於檢測大分子抗原。 (1) 加抗體包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋乾 (2) 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋乾  (3) 加酶標抗體 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋乾 (4) 加底物液 → 37℃ 15分鐘,加終止液 (5) 用ELISA檢測儀測定OD值。

相關疾病

肺並殖吸蟲病,幼兒急疹,潰瘍病出血,胃潰瘍

相關症狀

幽門管潰瘍,消化性潰瘍

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