酶促破碎法

通過細胞本身的酶或外加酶製劑的催化作用,使細胞外層結構受到破壞,從而達到破壞細胞的目的,稱為酶促破碎法。

基本介紹

  • 中文名:酶促破碎法
  • 套用:細胞破碎
細胞破碎的方法有很多,常用的有:機械法、物理法、化學法、酶促法。
酶促破碎法方法: 自溶法、外加酶製劑法
原理:通過細胞本身的酶系或外加酶製劑的催化作用,使細胞外層結構破壞,從而使細胞破碎。
詳情:通過細胞自身的酶系或者外加酶製劑的催化作用,細胞的外層結構遭到破壞,從而達到細胞破碎的方法。利用細胞本身的酶系的作用,在一定的pH和溫度條件下保溫一段時間,使細胞破壞,而使細胞內物質釋放出的方法,稱為自溶法。自溶法效果的好壞取決於溫度、pH、離子強度等自溶條件的選擇與控制。為了防止其他微生物在自溶細胞液中生長,必要時可以添加少量的甲苯氯仿疊氮鈉防腐劑
根據細胞外層結構的特點,還可以外加適當的酶作用於細胞,使細胞壁受到破壞,並在低滲透壓的溶液中使細胞破裂。在酶催化過程中,要根據細胞壁的結構特點選擇使用適宜的酶.並根據酶的動力學性質。控制好各種催化條件。用組織自溶或用溶菌酶、脫氧核糖核酸酶磷脂酶等降解細胞膜結構,然後再進行提取。但應知道組織自溶法對某些酶的提取是不利的,如胰蛋白是以酶原形式純化後再激活成胰蛋白酶的。若用自溶法提取,酶原已轉成酶,純化就很困難;而用純的工具酶降解法無此缺點,但成本較高。

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