酶促合成

酶促合成(又稱基因的半合成): 全基因,特別是較大的基因的全部化學合成成本昂貴使用半合成的方法可以降低成本,從而利於普及使用。首先合成末端之間有10~ 14 個互補鹼基的寡核苷酸片段,退火後以重疊區作為引物,在4 種dNTP 存在的條件下,通過DNA 聚合酶I大片段(Klenow 酶) 或反轉錄酶的作用,獲得兩條完整的互補雙鏈。

在合成基因的結構中,應包括有克隆和表達所需要的全部信號及DNA 順序,基因密碼的閱讀框架也應該同表達體系相適應。此外,由於不同種類的生物體或密碼子的使用都具有明顯的選擇性,在基因合成和克隆時必須考慮這個問題。選擇合適的密碼子,以獲得高效表達。

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