酵母雙雜交機制

酵母雙雜交機制是將待研究的兩種蛋白質的基因分別克隆到酵母表達質粒的轉錄激活因子(如GAL4等)的DNA結合結構域基因,構建成融合表達載體,從表達產物分析兩種蛋白質相互作用的機制。例如酵母轉錄因子 GAL4在結構上是組件式的(modular),往往由兩個或兩個以上結構上可以分開,功能上相互獨立的結構域(domain)構成。

兩個結合域將它們分開時仍分別具有功能,但不能激活轉錄,只有當被分開的兩者通過適當的途徑在空間上較為接近時,才能重新呈現完整的GAL4轉錄因子活性,並可激活上游激活序列(upstream activating sequence,UAS)的下游啟動子,使啟動子下游基因得到轉錄。

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