基本介紹
- 中文名:選擇噬菌體抗性培養基
- 外文名:Select phage resistant medium
- 學科:食品加工工藝學
- 目的:篩選出抗噬菌體的菌株
噬菌體污染一直是困擾發酵工業的一大世界性難題。特別是在乳製品的生產中,發酵的環境比較開放,發酵規模大,這些都易導致噬菌體的侵入。輕則使乳酸菌產酸能力下降導致發酵延遲,重則使菌體裂解致使發酵失敗,給生產者帶來巨大的經濟損失...
在乳品生產中已經採用了大量的技術手段來減少噬菌體感染,包括過濾空氣、將發酵劑製備區同生產區分開、採用直投式發酵劑、套用密閉的發酵罐、輪換髮酵劑菌株以及利用噬菌體抗性培養基。但是,採用這些措施並不能完全消滅在工業生產中導致嚴重問題的噬菌體。因此,人們對噬菌體一宿主之間的相互作用和噬菌體生物學進行了大量...
(2)半固體培養基。是在液體培養基中加入少量凝固劑而呈半固體狀態。可用於觀察細菌的運動、鑑定菌種和測定噬菌體的效價等方面。用於觀察微生物運動特徵。如圖2,左側試管中微生物不運動,而右側試管中微生物運動,因而兩試管中現象不同。(3)液體培養基。液體培養基中不加任何凝固劑。這種培養基的成分均勻,微...
5.無細菌、黴菌、支原體和病毒的污染,有些國家要求無細菌噬菌體污染。6.對細胞有良好的支持繁殖作用。我國在對牛血清的質量2000年版《中國生物製品主要原輔料質控標準》中提出比較嚴格的標準要求。包括蛋白質含量,細菌、真菌、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細菌內毒素,支持細胞增殖檢查。培養基配製 一、配製用...
λ噬菌體載體不具有質粒載體的抗生素抗性的標記基因;因此,對λ重組分子的選擇主要有下面幾種方法。①cI基因功能選擇cI基因編碼的阻遏蛋白可使感染了λ噬菌體的大腸桿菌進入溶原化狀態。如果在插入型載體的克隆位點上,或是置換型載體的可置換片段中,放上一個cI基因,當外源DNA插入或取代時,便破壞了cI基因,使出現...
對抗性系統,篩選時需要採用包含有藥劑及噬菌體的選擇培養基等。有時按照所需要選擇的不同性狀,往往在操作上要比上面所說的更為複雜。影印平板法已經作為一種細微巧妙的方法加以套用。通過這一方法及其結果的統計分析,現已認定,適應於抗性物質所獲得的抗性以及在基因表達對條件的需求等諸方面所產生的這種與正常生活...
微生物遺傳學研究則不同,一般工作常從篩選特定的突變型開始,例如篩選不能合成某一種胺基酸的突變型(營養缺陷型)、對於某一種藥物或噬菌體具有抗性的突變型、在較高溫度中不能進行DNA 複製的突變型、轉化過程中發生遺傳性障礙的突變型、某一特定的酶發生缺陷的突變型以及導致某一種蛋白質的某一功能區發生變化的...
選擇性標誌:編碼抗生素抗性的基因對質粒載體來說是最普遍的細菌選擇性標誌(如pBR322);主要的抗生素選擇基因有:氨苄青黴素,氯黴素,四環素和卡那黴素四種。轉化的宿主菌一般都是抗生素敏感型的,獲得質粒後,它能在有抗生素的平板上生長,從而達到篩選的要求。另一個顯性的選擇標誌就是對λ噬菌體感染的免疫(也就...
其類型包括:(1)形態突變株,如影響細胞結構、細胞形態、菌落形態和噬菌斑形態等的突變株;(2)生理生化突變株,如營養缺陷突變型和影響糖的分解利用或色素的產生等突變株;(3)抗性突變株,如耐藥性、噬菌體抗性和紫外線抗性等突變株。(4)條件致死突變株,如溫度敏感突變株等。基因突變 突變,在生物學上的含義是...
Sp6、T7是來源於噬菌體的啟動子,用於插入片段末端測序。P1人工染色體載體(PAC)結合了P1載體和BAC載體的最佳特性,包括陽性選擇標記sacB及噬菌體P1的質粒複製子和裂解性複製子。然而除了將連線產物包裝進λ噬菌體顆粒以及在cre—loxP位點使用位點特異性重組產生質粒分子以外,在載體連線過程中產生的環狀重組PAC也可能用電...
在含有某一種藥物的培養基中培養細菌時往往可以得到對於這一藥物具有抗性的細菌,因此曾經認為細菌的抗藥性的產生是藥物引起的,是定向的適應而不是隨機的突變。S.盧里亞和M.德爾布呂克在1943年首先用波動測驗方法證明在大腸桿菌中的抗噬菌體細菌的出現和噬菌體的存在無關。J.萊德伯格等在1952年又用印影接種方法...
P1噬菌體載體是在P1噬菌體的基礎上構建的克隆載體,用於克隆真核基因組DNA。P1派生人工染色體(PAC)是將BAC和P1噬菌體載體二者優點結合起來的克隆體系,可以克隆100-300kb的外源DNA片段。特點 (1)含有卡那黴素抗性基因,便於篩選 (2)由於其在宿主細胞中以單拷貝的形式存在,避免了因多拷貝造成的不穩定。哺乳...
這樣,噬菌體顆粒在感染菌體內重組DNA通過噬菌體的黏端而環化,並可以在宿主內自我複製,表達抗性標記。例如採用黏粒C2RB進行克隆時,首先在插入位點和兩個C08基因之間切開載體,插入外源DNA,由於在兩cos基因之間有一個完整的質粒序列,在體外包裝成為病毒顆粒後可感染大腸桿菌,根據其抗藥標誌選擇轉化子菌落。常用的...
抗性突變型 抗性突變型是指微生物對某種化學藥物或致死物理因子抗性的突變。根據其抵抗對象的不同可分為抗藥性、抗紫外線或抗噬菌體等突變型。這些突變類型極易獲得,已廣泛套用於遺傳學基本理論的研究中,主要用作選擇性標記菌種。除上述主要突變類型以外,還有其他一些突變型,如毒力、糖發酵能力、代謝產物的種類和...
在食品級乳酸菌中已經形成了一系列適合乳酸菌的基因表達系統,例如:糖誘導表達系統,噬菌體Φ31爆發式誘導的表達系統、乳鏈球菌素調控表達系統、 pH值調控表達系統等。糖誘導表達系統 乳酸菌基因組中含有糖代謝相關基因簇,在以各種糖類為碳源的培養基上生長。在乳酸菌的糖誘導表達系統中,主要套用的是糖類選擇標記。
6.3.2可培養微生物和不可培養微生物(168)6.4環境微生物基因組信息所展示的生物進化規律(170)6.4.1分子系統發育分析(170)6.4.2DNA和蛋白質的進化(172)6.4.3基因組的生物多樣性(175)6.4.4環境微生物抗生素抗性的生態規律(179)6.5廢水處理中的微生物群落及其分子生態學分析(180)6.5.1好氧活性...
第二章乳酸細菌的分離和培養 第一節選擇分離和培養方法的原則 一、乳酸細菌在自然界的生存區域和生活環境 二、必需的營養組分 三、對氧的要求 四、適宜的生長溫度和pH範圍 第二節乳桿菌屬的分離和培養 一、半選擇性培養基 二、選擇性培養基 三、不同生境乳桿菌分離的培養基 四、培養的氣態環境和溫度 第三節...
常用兩種方法:①轉化或轉染,方法是將重組質粒DNA或噬菌體DNA(M13)與氯化鈣處理過的宿主細胞混合置於冰上,待DNA被吸收後鋪在平板培養基上,再根據實驗設計使用選擇性培養基篩選重組子,通常重組分子的轉化效率比非重組DNA低,原因是連線效率不高,有許多DNA分子無轉化能力,而且重組後的DNA分子比原載體DNA分子大,...
我國蘇雲金桿菌製劑研製始於60年代,經過科技人員的多年努力,在菌株選育、發酵生產工藝、產品劑型和套用技術等方面均有突破,尤其在液體深層發酵技術方面,噬菌體倒灌率從10%以上降到1%以下,這兩項指標均達國際先進水平。蘇雲金桿菌的研究開發正向改善工藝流程、提高產品質量和擴大防治對象的方向發展,同時對蘇雲金桿菌的...
五、固體培養基的設計與選擇031 六、真菌的培養032 參考文獻035 第二章抗生素產生菌菌種最佳化的理論與方法037 第一節自然選育038 一、菌種自然選育的方法039 二、自然選育的操作過程040 第二節誘變育種040 一、誘變因子及其育種的分子機制041 二、誘變因子的使用方法046 三、特定目的的誘變育種——抗噬菌體菌株的...
第10章 培養方法 10.1 細菌計數的培養方法 10.1.1 計數和分離技術 10.1.2 平板法 10.1.3 最大機率數法 10.2 細菌培養基 10.3 真菌培養方法 10.4 藻類和藍細菌的培養方法 10.5 細胞培養——檢測病毒的基礎 提問和疑難問題 參考文獻和推薦閱讀材料 第11章 ...
類似的還有“駢連體遺傳實驗”、“眼蟲藻色素體遺傳實驗”、“噬菌體傳導遺傳實驗”等。以上實驗從不同角度證實了獲得性能夠遺傳。但是意義(至少筆者這樣認為)並不是特別重大。具有重大意義的是以下這幾個實驗:4. 凱恩斯實驗 1988年(之前),分子生物學家凱恩斯設計了一個奇妙的實驗。他們選擇一種有缺陷的大腸桿菌...
mRNA存在於原核和真核生物的細胞質及真核細胞的某些細胞器(如線粒體和葉綠體)中。RNA病毒和RNA噬菌體中的RNA既是遺傳信息的載體又具有mRNA的功能。生物體mRNA種類的多少與生物進化水平有關,高等生物所含的遺傳信息多,mRNA的種類也多。生物體內某種mRNA的含量根據需要而有不同,如5齡蠶後部絲腺體的主要任務是...
如此處所用,術語“轉化”和“轉染”、“接合”和“轉導”意指該領域內公知的各種將外源核酸(例如,線性DNA或RNA(例如,線性化載體或無載體的單獨的基因構建體))或載體形式的核酸(例如,質粒、粘粒、噬菌體、噬粒、噬菌粒、轉座子或其它DNA)導入宿主細胞的技術,包括磷酸鈣或氯化鈣共沉澱、DEAE-葡聚糖-介導...
目前能克隆大片段外源DNA的最佳載體為酵母人工染色體(YAC),自從1986年YAC被用來克隆大片段的外源DNA以來[2],其載體發展很快,現已能克隆105~106鹼基的外源DNA片段,而粘粒和噬菌體載體所能克隆的外源DNA片段分別為40×103鹼基和20×103鹼基左右。儘管YAC也有不少不盡人意的地方,如常常出現的外源DNA拼接在一起...
SenGupta等利用RNA噬菌體衣殼蛋白能識別結合其基因組內一種21核苷酸的RNA莖環結構的特性,將RNA噬菌體衣殼蛋白與LexDB域融合,構建成可用於尋找體內的RNA結合蛋白的酵母三雜交系統〔14〕。核外雙雜交技術在傳統的酵母雙雜交系統中,蛋白之間的相互作用是在細胞核內發生的。因此,它不能檢測某些在核外蛋白之間的相互作用...
自發突變具有不定向而且是隨機發生的特徵。也就是說,突變的效應並不對應於環境因素的性質:例如,低溫並不能引起耐寒性突變;細菌的抗性突變與所接觸的抗生素藥物或噬菌體無關,藥物或噬菌體只是以一種自發突變體的選擇因子在起作用。群體中某基因的定向改變是由特定的選擇因素的作用造成的,並非生物體的定向變異的...
第二節 種子培養 一、搖瓶種液的製備 二、種子罐擴大培養 第三節 50m3罐發酵及發酵條件控制 一、發酵培養基及配料 二、50m3罐批報舉例 三、發酵控制的主要參數 四、黃色短桿菌SGRNO18發酵條件控制總結 第四節 胺基酸發酵雜菌和噬菌體的防止 一、染菌 二、噬菌體 第四章 發酵設備、功率消耗和傳氧係數 第一...
五、固體培養基的設計與選擇25 參考文獻25 第二章 生素產生菌菌種最佳化的理論與方法26 第一節 然選育27 一、菌種自然選育的方法27 二、自然選育的操作過程28 第二節 變育種29 一、誘變因子的作用機理29 二、誘變因子的使用方法32 三、誘變育種的新技術34 四、特定目的的誘變育種——抗噬菌體菌株的誘變36 五...
在常發病田塊,選擇低洼肥沃的田塊,種植當地有代表性的感病品種及主要栽培稻種,多施氮肥和長期灌溉,製造適於發病條件。在常年發病始期勤檢查,發現中心病株,對急性型病斑出現(病葉上菌膿較多可按雨量、雨日、暴風等)情況進行預報。用噬菌體檢測田間菌量 稻田水中的噬菌體消長與病菌的消長是一致的,即病菌開始...