雙層平板法,先在培養皿中倒入底層固體培養基,凝固後再倒入含有宿主細菌和一定稀釋度噬菌體的半固體培養基。培養一段時間後,計算噬菌斑的數量。
基本介紹
- 中文名:雙層平板法
- 方法:雙層瓊脂平板法
- 恆溫培養:30℃恆溫培養6~12h觀察結果
- 觀察結果:雙層培養基的上層出現透亮空斑
又叫雙層瓊脂平板法
方法:雙層瓊脂平板法
1 倒下層瓊脂
融化下層培養基,倒平板(約10mL/皿)待用。
2 倒上層瓊脂
融化上層培養基,待融化的上層培養基冷卻至50℃左右時,每管中加入敏感指示菌 (大腸桿菌) 菌液0.2mL,待檢樣品液或上述噬菌體增殖液0.2~0.5mL,混合後立即倒入上層平板鋪平。
3 恆溫培養
30℃恆溫培養6~12h觀察結果。
4 觀察結果
如有噬菌體,則在雙層培養基的上層出現透亮無菌圓形空斑——噬菌斑