連線酶鏈反應(LCR)

連線酶鏈反應(ligase chain reaction,LCR),是一種新的DNA 體外擴增和檢測技術，主要用於點突變的研究及靶基因的擴增。連線酶鏈反應是Backman1997 年為檢出靶基因序列中的點突變而設計發明的，並申報了專利。

基本介紹

• 中文名：連線酶鏈反應(LCR)
• 外文名：ligase chain reaction,LCR

ILCR的基本原理是利用DNA連線酶異地將雙鏈DNA片段連線，經變性退火連線三步驟反覆循環，從而使靶基因序列大量擴增在模DNA、DNA連線酶、寡核特酸引物以及相應的反應條件下，首先加熱至一定溫度下(94~95C)使DNA變性，雙鏈打開，然後降溫退火(65C)，引物與之互補的模板DNA結合併留下一缺口，如果與靶序列雜交的相鄰的寡核苷酸引物與靶序列完全互補，DNA連線酶即可連線封閉這一缺口，則LCR反應的三步驟(變性一退火連線)就能反覆進行，每次連線反應的產物又可在下一輪反應中作模板，使更多的寡核苷酸被連線與擴增。若連線處的靶序列有點突變，引物不能與靶序列精確結合，缺口附近核苷酸的空間結構發生變化，連線反應不能進行，也就不能形成連線產物。