轉錄因子ThPOK在T細胞發育分化中的功能和機制

《轉錄因子ThPOK在T細胞發育分化中的功能和機制》是依託浙江大學，由汪洌擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：轉錄因子ThPOK在T細胞發育分化中的功能和機制
• 依託單位：浙江大學
• 項目負責人：汪洌
• 項目類別：面上項目

項目摘要

CD4＋和CD8＋T細胞的發育分化是個複雜而又受著精細調控的過程，一直是免疫學重點研究領域。申請人所在實驗室發現的ThPOK(cKrox/Zbtb7b)屬於鋅指蛋白家族，為至今已知最強調控該過程的轉錄因子。圍繞它的關鍵問題，即ThPOK是通過何種機制調控下游何種靶基因從而達到影響T細胞發育分化是直接關係到此領域研究進一步展開的重要方向，也是本項目期待解決的問題。申請人希望通過獲取全基因組ThPOK蛋白結合信息（ChIP-Seq），結合構建ThPOK缺陷型CD4＋T細胞體系，研究相關基因（CD8，Runx3等）的轉錄關鍵區DNA甲基化和組蛋白修飾以揭示其調控機制。同時結合基因晶片信息，利用反轉錄病毒高轉染T細胞系統篩選ThPOK靶基因，從而確定功能基因並構建其T細胞特異性轉基因小鼠以分析相關表型。上述結果可望為T細胞分化發育的研究提出新的學術觀點，為解決T淋巴細胞功能缺陷性疾病帶來可能。

結題摘要

傳統T細胞在定向分化的過程中受到重要轉錄因子ThPok與Runx3的調控，其中ThPok促進雙陽性前體細胞向CD4+T方向進行分化，而Runx3則通過活化CD8位點，沉默CD4位點，抑制ThPok表達，從而在CD8+T細胞定向分化過程中發揮促進作用。然而，這兩種互相拮抗的轉錄因子在iNKT細胞中的作用卻並沒有被廣泛認知。已知在小鼠中，CD1d分子限制性的iNKT細胞主要分化為CD4+單陽性和CD4-CD8-雙陰性兩個亞群，而不同亞群iNKT細胞在活化後能夠分泌Th1，Th2以及Th17型細胞因子，且近年來已有文獻報導，在ThPok缺失小鼠中出現一群比例和數量都明顯增加的CD8+iNKT細胞，故我們在此基礎上提出研究問題，ThPok缺失小鼠中出現的CD8+iNKT細胞是否與CD8譜系特異性轉錄因子Runx3有關，而轉錄因子Runx3又對iNKT細胞的分化發育和功能具有怎樣的影響。研究中，我們利用Runx3敲除，ThPok敲除以及Runx3/ThPok雙敲小鼠進行了NKT細胞的表型及功能的分析，結果發現，轉錄因子Runx3能夠部分影響ThPok缺失小鼠中CD8+iNKT細胞的表達，此外，在ThPok缺失的情況下，Runx3能夠參與到iNKT細胞在α-Galcer誘導的小鼠急性肝炎模型中的免疫應答。研究結果證明了Runx3對ThPok敲除小鼠中iNKT細胞的表型及功能有重要作用。