轉染實驗技術

《轉染實驗技術》是2013年化學工業出版社出版的圖書，作者是馬文麗。

基本介紹

• 書名：轉染實驗技術
• 作者：馬文麗 編
• ISBN：9787122162212
• 頁數：147
• 定價：49.00元
• 出版社：化學工業出版社
• 出版時間：2013-3
• 副標題：轉染實驗技術

內容介紹

《生物實驗室系列:轉染實驗技術》覆蓋了轉染前目的基因的獲取、載體的選擇，多種轉染技術，轉染技術的套用等。作為一本實驗技術類書籍，《生物實驗室系列:轉染實驗技術》不僅較詳細地闡述了有關技術的具體操作和程式，更著力於對各種技術的基本原理及其相關理論基礎進行深層次的剖析。

《生物實驗室系列:轉染實驗技術》不僅可作為從事生命科學，特別是分子生物學相關領域工作者的實驗室必備參考工具書，同：時也可供高校相關專業師生及科學工作者對轉染實驗技術的理論做深入探討時參考。

目錄信息

第1章轉染實驗技術概述1

11轉染實驗技術簡介1

111轉染實驗技術的概念1

112外源基因轉染真核細胞的目的、意義1

12轉染實驗技術的分類及原理2

121病毒感染法2

122非病毒感染法3

13轉染實驗技術的套用5

14新材料與新技術在轉染實驗技術中的套用7

參考文獻8

第2章目的基因的獲取9

21目的基因概述9

22化學合成法獲取目的基因11

221磷酸二酯法12

222磷酸三酯法14

223亞磷酸三酯法15

224寡核苷酸連線法15

23基因組文庫釣取目的基因17

24cDNA文庫釣取目的基因19

241mRNA的分離純化(過程)20

242雙鏈cDNA的體外合成20

25PCR獲取目的基因24

251PCR擴增DNA的基本原理24

252PCR擴增產物的克隆26

253PCR技術在目的基因製備中的套用27

26RTPCR法獲取目的基因27

參考文獻28

第3章基因表達載體的選擇29

31基因表達載體概述29

32基因表達載體分類31

33基因表達載體的遺傳標記32

34常用原核基因表達質粒載體34

35常用真核基因表達質粒載體38

36病毒型表達載體42

361噬菌體載體43

362反轉錄病毒載體49

363腺病毒載體52

37可表達融合蛋白的載體54

371谷光甘肽S轉移酶(GST)融合蛋白載體54

372pMALTM融合蛋白表達載體56

38基因表達載體的改造57

381報導基因的改造57

382啟動子的研究57

383大容量載體57

參考文獻58

第4章重組子的構建與鑑定59

41限制性內切酶59

42黏斷連線方法及重點技術60

421單酶切位點的連線60

422雙酶切位點的連線61

423同工異源酶及同尾酶酶切位點的連線62

43平端連線方法及重點技術62

44酶切位點的改造和連線63

441黏斷切口轉化為平端切口的連線63

442人工接頭的設計及人工黏斷切口的製備63

443酶切位點的化學修飾64

45重組子的篩選與鑑定64

451表型水平篩選65

452分子水平鑑定66

參考文獻68

第5章化學轉染方法將重組體導入真核細胞69

51磷酸鈣共沉澱法69

511磷酸鈣共沉澱法原理69

512轉染試劑、材料69

513儀器設備70

514操作步驟70

515注意事項及影響因素72

52DEAE葡聚糖法轉染73

521DEAE葡聚糖法轉染原理73

522轉染試劑 73

523儀器設備74

524操作步驟74

525操作注意事項74

53脂質體介導的轉染75

531脂質體介導的轉染原理75

532轉染試劑77

533儀器設備77

534操作步驟77

535操作注意事項78

54納米材料介導的轉染78

541納米材料介導的轉染原理79

542轉染試劑79

543儀器設備79

544操作步驟79

545操作注意事項81

參考文獻81

第6章物理轉染方法將重組體導入真核細胞82

61顯微注射法轉染82

611顯微注射法原理83

612轉染試劑83

613儀器設備83

614操作步驟84

615操作注意事項85

62電穿孔法轉染86

621電穿孔法轉染原理86

622轉染試劑87

623儀器設備88

624操作步驟89

625操作注意事項89

63基因槍轉染90

631基因槍技術的發展歷史90

632基因槍介導的轉染原理和設備90

633轉染試劑：微彈載體、DNA微載體92

634操作步驟93

635操作注意事項94

636基因槍技術作為新興的轉移基因的優點94

637基因槍的發展趨勢94

參考文獻95

第7章病毒轉染方法將重組體導入真核細胞96

71病毒轉染系統概述96

72包裝細胞概述96

73高濃度病毒原液的收集及滴度測定方法97

731高濃度病毒原液收集97

732病毒滴度測定方法97

74病毒轉染的輔助系統98

741轉染試劑98

742細胞狀態98

743轉染方法98

744載體構建100

75腺病毒介導的轉染100

751腺病毒介導的轉染原理100

752轉染試劑101

753儀器設備104

754操作步驟105

755操作注意事項112

76反轉錄病毒介導的轉染112

761反轉錄病毒介導的轉染原理112

762轉染試劑115

763儀器設備116

764操作步驟116

765操作注意事項118

參考文獻119

第8章轉染成功細胞的選擇120

81遺傳報導基因系統120

811報導基因系統概述120

812報導基因的分類及使用選擇122

813報導基因技術的前景展望123

814常見的報導基因124

82報導基因的同位素分析法127

821放射性同位素的基本性質128

822射線的防護128

83報導基因的非同位素分析法129

831酶聯免疫法（ELISA）129

832螢光法133

833免疫組織化學染色法133

參考文獻135

第9章轉染技術的套用137

91轉基因動物及基因敲除動物137

911轉基因動物的定義137

912製備轉基因動物的方法137

913基因敲除動物138

92轉基因植物139

921轉基因植物的定義139

922常用的植物轉基因方法139

923轉基因植物的主要套用方向140

93基因製藥140

931基因製藥概述140

932基因工程藥物生產的基本過程141

933基因製藥技術的主要套用141

94基因治療142

941遺傳性疾病的基因治療142

942腫瘤基因治療143

943其他疾病的基因治療143

95RNA干擾治療143

951在骨病治療中的套用144

952在神經系統疾病中的套用144

953在腫瘤治療中的套用145

954在抗病毒治療中的套用145

955在皮膚病治療中的套用145

參考文獻146