轉染作用

轉染作用是DNA小片段插入體細胞或細胞系的過程。若此DNA未與宿主細胞DNA整合而獲表達，稱“瞬時轉染(transient transfection)”；若與宿主細胞DNA整合併隨後者的複製而複製稱“穩定轉染，常規轉染技術可分為兩大類，一類是瞬時轉染，一類是穩定轉染（永久轉染）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數，產生高水平的表達，但通常只持續幾天，多用於啟動子和其它調控元件的分析。

一般來說，超螺旋質粒DNA轉染效率較高，在轉染後24-72小時內（依賴於各種不同的構建）分析結果，常常用到一些報告系統如螢光蛋白，β半乳糖苷酶等來幫助檢測。後者也稱穩定轉染，外源DNA既可以整合到宿主染色體中，也可能作為一種游離體（episome）存在。儘管線性DNA比超螺旋DNA轉入量低但整合率高。外源DNA整合到染色體中機率很小，大約1/104轉染細胞能整合，通常需要通過一些選擇性標記，如來氨丙基轉移酶（APH；新黴素抗性基因），潮黴素B磷酸轉移酶（HPH），胸苷激酶（TK）等反覆篩選，得到穩定轉染的同源細胞系。