《載體骨架CpG化修飾對新型複製子DNA疫苗免疫調節作用研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由余雲舟擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：載體骨架CpG化修飾對新型複製子DNA疫苗免疫調節作用研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：余雲舟
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
CpG序列是一種極具套用潛力的新型疫苗佐劑，可使疫苗抗原免疫反應以不同方式進行免疫調節及放大，按照結構和功能特點分為三種類型。而新型複製子DNA疫苗具有良好的免疫原性並優於傳統DNA核酸疫苗。將CpG序列和新型複製子DNA疫苗進行組合，在LacZ和肉毒毒素Hc上證實其有效性。本研究以炭疽PA為新的目標抗原，通過動物實驗來研究這三種不同類型的CpG及組合CpG佐劑序列修飾載體骨架對複製子DNA疫苗（以傳統DNA核酸疫苗為對照）體液、細胞免疫及細胞因子如IL-4/6和IFN-α/γ等的影響和改變，探討免疫調節作用及機制，分析CpG及組合CpG佐劑在以上幾方面免疫效果的差異和免疫反應途經，為炭疽疫苗確定最佳CpG佐劑及CpG化的新型複製子DNA疫苗，同時也為類似抗原疫苗或其他抗原的研究套用提供實驗數據和理論基礎，並且研究複製子DNA疫苗的免疫增強效果和兩者相互作用的免疫協調作用及機制。
結題摘要
CpG序列是一種包括A、B和C三種類型的新型疫苗佐劑，將CpG序列插入到DNA載體中作為內源性佐劑來研究它的免疫調節作用，具有重要的意義。本項目按研究計畫將CpG序列和新型病毒複製子DNA載體進行組合，並且以傳統非病毒DNA載體為平行實驗，研究CpG佐劑的免疫效應以及在不同抗原上的免疫調節作用。首先在LacZ和AHc上證實CpG序列的有效性，能夠免疫調節和增強兩種DNA載體疫苗的免疫原性和保護水平。然後，重點以炭疽PA4和PA為抗原，研究結果表明這三種不同類型的5或20個拷貝數CpG對複製子DNA和傳統DNA核酸疫苗均有明顯的免疫調節作用，增強了體液、細胞免疫及保護作用。但是它們在這兩種DNA疫苗以及在PA4和PA抗原上具體的免疫調節方式有差異。更多拷貝數CpG和組合CpG時進一步增強了複製子DNA疫苗的效應，減少免疫次數並產生更強的抗體和保護水平。不同位置各類CpG組合對疫苗效應無差異均有效，20A和20B組合相當於40C，組合中 B類CpG佐劑對於複製子載體有協調作用產生了強的免疫效應。CpG20C對全部載體和抗原均有效，同之前CpG5C的結果相同，因此提示C類CpG是合適且通用的佐劑。在機制研究方面，確定了有無CpG修飾對複製子載體本身的特性無影響，並且CpG化修飾後能夠進一步增強它的疫苗效應。另外，不同數量CpG序列或組合型CpG化的複製子和傳統DNA載體都能夠體外刺激人PBMC的增殖以及分泌產生細胞因子，這個結果與體內的結果一起表明該CpG作為DNA載體上的序列具有良好的佐劑效應，可直接套用為內源性佐劑，並且CpG及組合化 CpG與DNA複製子載體能夠同步或協調免疫應答反應，產生高水平的抗體和細胞免疫反應以及保護作用。對炭疽免疫保護機制，抗體水平是重要的指標，但細胞免疫也很重要，它通過T細胞免疫反應直接發揮作用，或間接地由CD4+T細胞輔助或直接激活B細胞產生大量的抗體來中和病原體。總之，以不同抗原如LacZ（Th1）、AHc（Th2）和PA4/PA(Th1/Th2型)為目標，三類不同CpG和CpG組合修飾的兩種DNA載體為疫苗，全面系統地評價了它們的免疫原性和保護作用，研究和分析包括體外和體內的各種指標和數據，獲得了一系列有意義的結果和結論，為類似抗原或其他抗原疫苗的設計研究和在人體臨床上套用提供實驗數據和理論基礎。
