載脂蛋白AⅡ

基本介紹

• 名稱：載脂蛋白AⅡ
• 所屬分類：生化檢查

正常值

250-520mg/L。

臨床意義

降低：冠心病、糖尿病、腎病綜合徵、遺傳性ApoA-Ⅰ缺乏症(Tangier病)、家族性低α-脂蛋白血症、魚眼病、重度營養不良、肝炎活動期、肝功能低下。

注意事項

(1)免疫透射比濁法：　①關於抗血清：比濁測定與其他方法相比對抗血清的要求更高。比濁法以用多克隆抗體為宜。抗血清中必須不含雜抗體。必須十分重視從人血清中提取的apoA-Ⅱ達到免疫純、色譜純與電泳純，這不是一般實驗室都能做到的。抗血清效價(滴度)不可低於16。目前國內某些商品試劑中，apoA-Ⅱ抗血清效價極低，選購試劑盒時必須注意。如果沒有在選購前鑑定抗血清質量的經驗，應請有條件的單位鑑定之。　②上法中標本(血清)稀釋200倍是為了便於手工操作(加樣100μl)，如有精密加樣器，可作20倍稀釋(用10μl)。為了適合不同實驗室的條件(如不同類型的自動化儀器)，作適當修改時應注意抗原抗體的比例，必須十分注意反應體系中不可有抗原過量，線性上限不可低於2.5g/L。換言之，抗血清用量必須充裕，否則標本中apoA-Ⅰ高水平時測出結果偏低。目前國內某些商品試劑盒不但抗血清效價過低，操作中所定標本用量又過大(如3-5μl)，抗體明顯不足，測出結果必然不準確。　③為了達到準確測定的目的，apoA-Ⅱ與B比濁測定(終點法)中必須作校準曲線計算結果。一定範圍(低標本用量)濃度(X)與濁度(Y)基本上成直線關係，直線回歸計算出在Y軸上有一定截距(A值<0.1)，所以用單點校準計算結果偏差較大，使測出結果不能準確反映濃度的高低(高的偏低，低的偏高)。千萬不要因為單點法簡便而忽略了測定的準確性。無論用何種自動化儀器，必須先試作校準曲線。如果在所用儀器及特定條件下反覆測試，回歸線的截距不明顯時，才能採用單點校準法。標本用量在3-5μl時，即使加大抗血清用量，濃度與濁度也不成直線關係，只能用曲線直線化轉換後計算。　④主要干擾因素是血清本身的混濁(如高脂血清)，用超離心或脂肪酶水解等標本預處理方法都不實用。用表面活性劑消濁的作用也有限，所以在測定中必須作標本空白管。除了自動分析中可採用兩點法外，手工法用單一試劑而不扣除標本空白的做法是錯誤的。為了減少基質效應對濁度反應的影響，必須用定值血清作校準物。此外，塵埃粒子、比濁皿劃痕等干擾也必須排除。　⑤有的商品試劑盒(包括某些進口產品)所附校準血清定值不準確，是誤差的重要來源。　(2)火箭電泳法：　①抗原稀釋倍數與抗血清用量的選擇，應以火箭峰清晰、校準曲線斜率適中並成直線為宜。本法同時測定apoA-Ⅱ與apoB，應調整兩種抗血清用量，使二者峰高有區別，apoB峰高不小於1cm。　②不同種類來源的抗血清(如兔與羊)，在等效價的情況下進行試驗，結果會有差異。apoA-Ⅰ測定以兔抗血清為好。用兔血清時峰形尖細，而羊血清所產生的峰粗，峰尖圓鈍，有時在峰頂前出現虛影。校準血清所作校準曲線斜率也不同。但不論用何種抗血清，定量結果差別不大。　③在一定條件下電泳，不同稀釋度校準血清的峰高不會有明顯變動，校準曲線斜率基本一致。如標本峰高超出校準曲線範圍時，應調整標本稀釋倍數後重測。板間CV通常小於5%。　④火箭電泳結果可以用染色法或直接肉眼觀察可見的火箭峰。前者用標本少，節省抗血清，但如適當增加標本及抗血清用量，不染色更為方便。所用瓊脂糖應為標準電滲或低電滲的，凝膠中加入適量葡聚糖或聚乙二醇可使火箭峰更清晰。　⑤火箭峰的測量可以計算面積或峰高，面積是峰高乘以峰寬(峰半高處的寬度)。測量精度最好能達0.1mm。須用機械或電子放大設備。標準曲線範圍內峰高以1-4cm為宜。　⑥本法適用於少量標本分析。也適用於apoAⅡ、CⅠ、CⅡ、CⅢ、D、E及Lp(a)測定。