載脂蛋白AⅡ

載脂蛋白是血漿脂蛋白部分各類脂蛋中均含有一種和幾種不同特異性載脂蛋白。目前已經發現的載脂蛋白有20餘種。其中主要有aPOA1、AⅡ、B-100、B48、CⅠ、CⅡ、CⅢ、D、E等。

基本介紹

• 名稱：載脂蛋白AⅡ
• 所屬分類：生化檢查

正常值

250-520mg/L。

臨床意義

降低：冠心病、糖尿病、腎病綜合徵、遺傳性ApoA-Ⅰ缺乏症(Tangier病)、家族性低α-脂蛋白血症、魚眼病、重度營養不良、肝炎活動期、肝功能低下。

注意事項

(1)免疫透射比濁法：　①關於抗血清：比濁測定與其他方法相比對抗血清的要求更高。比濁法以用多克隆抗體為宜。抗血清中必須不含雜抗體。必須十分重視從人血清中提取的apoA-Ⅱ達到免疫純、色譜純與電泳純，這不是一般實驗室都能做到的。抗血清效價(滴度)不可低於16。目前國內某些商品試劑中，apoA-Ⅱ抗血清效價極低，選購試劑盒時必須注意。如果沒有在選購前鑑定抗血清質量的經驗，應請有條件的單位鑑定之。　②上法中標本(血清)稀釋200倍是為了便於手工操作(加樣100μl)，如有精密加樣器，可作20倍稀釋(用10μl)。為了適合不同實驗室的條件(如不同類型的自動化儀器)，作適當修改時應注意抗原抗體的比例，必須十分注意反應體系中不可有抗原過量，線性上限不可低於2.5g/L。換言之，抗血清用量必須充裕，否則標本中apoA-Ⅰ高水平時測出結果偏低。目前國內某些商品試劑盒不但抗血清效價過低，操作中所定標本用量又過大(如3-5μl)，抗體明顯不足，測出結果必然不準確。　③為了達到準確測定的目的，apoA-Ⅱ與B比濁測定(終點法)中必須作校準曲線計算結果。一定範圍(低標本用量)濃度(X)與濁度(Y)基本上成直線關係，直線回歸計算出在Y軸上有一定截距(A值<0.1)，所以用單點校準計算結果偏差較大，使測出結果不能準確反映濃度的高低(高的偏低，低的偏高)。千萬不要因為單點法簡便而忽略了測定的準確性。無論用何種自動化儀器，必須先試作校準曲線。如果在所用儀器及特定條件下反覆測試，回歸線的截距不明顯時，才能採用單點校準法。標本用量在3-5μl時，即使加大抗血清用量，濃度與濁度也不成直線關係，只能用曲線直線化轉換後計算。　④主要干擾因素是血清本身的混濁(如高脂血清)，用超離心或脂肪酶水解等標本預處理方法都不實用。用表面活性劑消濁的作用也有限，所以在測定中必須作標本空白管。除了自動分析中可採用兩點法外，手工法用單一試劑而不扣除標本空白的做法是錯誤的。為了減少基質效應對濁度反應的影響，必須用定值血清作校準物。此外，塵埃粒子、比濁皿劃痕等干擾也必須排除。　⑤有的商品試劑盒(包括某些進口產品)所附校準血清定值不準確，是誤差的重要來源。　(2)火箭電泳法：　①抗原稀釋倍數與抗血清用量的選擇，應以火箭峰清晰、校準曲線斜率適中並成直線為宜。本法同時測定apoA-Ⅱ與apoB，應調整兩種抗血清用量，使二者峰高有區別，apoB峰高不小於1cm。　②不同種類來源的抗血清(如兔與羊)，在等效價的情況下進行試驗，結果會有差異。apoA-Ⅰ測定以兔抗血清為好。用兔血清時峰形尖細，而羊血清所產生的峰粗，峰尖圓鈍，有時在峰頂前出現虛影。校準血清所作校準曲線斜率也不同。但不論用何種抗血清，定量結果差別不大。　③在一定條件下電泳，不同稀釋度校準血清的峰高不會有明顯變動，校準曲線斜率基本一致。如標本峰高超出校準曲線範圍時，應調整標本稀釋倍數後重測。板間CV通常小於5%。　④火箭電泳結果可以用染色法或直接肉眼觀察可見的火箭峰。前者用標本少，節省抗血清，但如適當增加標本及抗血清用量，不染色更為方便。所用瓊脂糖應為標準電滲或低電滲的，凝膠中加入適量葡聚糖或聚乙二醇可使火箭峰更清晰。　⑤火箭峰的測量可以計算面積或峰高，面積是峰高乘以峰寬(峰半高處的寬度)。測量精度最好能達0.1mm。須用機械或電子放大設備。標準曲線範圍內峰高以1-4cm為宜。　⑥本法適用於少量標本分析。也適用於apoAⅡ、CⅠ、CⅡ、CⅢ、D、E及Lp(a)測定。