《跨膜蛋白MS4A8B在前列腺癌癌變過程中的功能及分子機制》是依託同濟大學，由姚旭東擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：跨膜蛋白MS4A8B在前列腺癌癌變過程中的功能及分子機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：姚旭東
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
前列腺癌生物學行為複雜，四跨膜結構域A亞家族(MS4A)在腫瘤病理過程中的作用研究不多。MS4A8B是我們使用軟體對前列腺癌高通量數據篩選到的一個MS4A蛋白。我們前期工作顯示，MS4A8B在前列腺癌組織中特異高表達並與術後生化復發相關，體內外實驗可促進前列腺癌細胞增殖，然而其作用機制及意義有待研究。通過結構分析及預實驗，我們發現MS4A8B基因表達可能受雄激素受體(AR)轉錄調控，同時下調MS4A8B導致pAKT表達降低。因此，本項目提出MS4A8B通過雄激素反應構件(ARE)與AR結合而轉錄增加，作為銜接蛋白通過一系列信號轉導機制最終通過AKT通路實現細胞增殖的假說。為此，我們將採用雙螢光素酶報告基因、Co-IP、ChIP等手段，從分子、細胞、組織和動物水平探討MS4A8B在前列腺癌進展過程中的作用機制。本項目將從MS4A蛋白角度揭示前列腺癌病理過程的新機制，為前列腺癌治療提供新靶點。
結題摘要
MS4A8B是我們使用自主研發的高通量數據分析軟體篩選到的一個四次跨膜結構域蛋白，在前列腺癌中特異性表達。我們的前期工作結果顯示MS4A8B促進前列腺癌細胞生長，作為組織學標記物有助於前列腺癌患者的臨床診斷以及復發和預後預測，但詳細機制有待進一步探討。此外，使用生物信息學軟體結構分析及實驗，我們發現MS4A8B基因受AR轉錄調控；下調MS4A8B導致PI3K/pAKT也明顯下調。因此，本項目提出AR激活後通過與MS4A8B啟動子上游激素反應構件結合導致MS4A8B轉錄增加，並通過PI3K/AKT通路實現細胞增殖的假說。為此，我們採用免疫組化、RNAi、過表達、雙螢光素酶報告基因、免疫共沉澱等手段，從分子、細胞、組織和動物整體水平探討MS4A8B異常表達在前列腺癌發生髮展中的作用機制。以上問題的解決驗證了我們提出的“AR激活後通過與MS4A8B啟動子上游激素反應構件結合導致MS4A8B轉錄增加，並通過PI3K/AKT通路實現細胞增殖”的前期構想。本課題得出了以下結論：1. 明確了AR蛋白直接與MS4A8B啟動子序列特異性結合，轉錄水平調控MS4A8B的表達；2. 通過iTRAQ結合質譜分析發現了與MS4A8B直接結合的相互作用蛋白；3.證實了 MS4A8B是一種Ca2+離子通道，明確了MS4A8B作為跨膜蛋白發揮功能的分子機制；4.闡明了MS4A8B通過PI3K/AKT信號通路參與前列腺癌細胞增殖的調控。本課題的完成，從四次跨膜結構域蛋白角度揭示了前列腺癌發生髮展的新機制，為靶向MS4A8B的單克隆抗體用於前列腺癌基因治療的提供了理論依據。我們證實了MS4A8B是一種Ca2+離子通道，明確了MS4A8B作為跨膜蛋白發揮功能的分子機制，這為我們進一步和下一步地研究和明確前列腺癌發生、發展的分子機制，尋找有效的、特異性高的治療靶點，提供了新的方向。
