豬SLA I分子超級型及豬源重要病毒CTL交叉表位的研究

《豬SLA I分子超級型及豬源重要病毒CTL交叉表位的研究》是依託中國農業大學，由張念之擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：豬SLA I分子超級型及豬源重要病毒CTL交叉表位的研究
• 依託單位：中國農業大學
• 項目負責人：張念之
• 項目類別：青年科學基金項目

項目摘要

對豬主要組織相容性複合體（SLA）I分子進行超級型分類，鑑定豬源病毒的細胞毒性T淋巴細胞（CTL）交叉表位是開發豬用CTL表位疫苗的基礎，對於控制豬源病毒性疾病有重要的價值。本項目擬大量克隆、表達我國豬群中存在的SLA I分子，對其進行精確的分子建模；在此基礎上對不同SLA I分子的抗原結合區域進行分析，根據胺基酸組成的差異，對我國豬群中主要的SLA I分子進行超級型分類；利用生物信息學手段，篩選表型覆蓋率高的SLA I超級型分子所能結合的豬源重要病毒（豬瘟、藍耳病、口蹄疫、豬流感）的CTL表位；人工合成表位多肽，利用體外共復性、圓二色譜等技術鑑定多肽與相應SLA I分子的結合力，驗證SLA I超級型分類的正確性；進一步利用四聚體、流失細胞術及酶聯免疫斑點實驗等技術，鑑定結合力強的多肽是否為功能性CTL交叉表位。研究結果將為解決CTL表位疫苗在豬群中適用範圍窄的難題提供理論支持和數據儲備。

結題摘要

本研究旨在對我國豬群SLA I 分子超級型及豬源重要病毒CTL交叉表位進行研究，因此我們克隆了94條我國主要養殖豬種的SLA I等位基因並進行了系統發育及變異頻率的分析，將高變異位點定位到SLA I分子的結構中，發現這些位點集中分布在與抗原呈遞相關的多肽結合槽中。對豬群中的廣泛存在的SLA-1*0401及與其序列高度相似的等位基因進行了超級型分析，鑑定得到了3條流感病毒CTL交叉表位。構建了SLA-1*0401突變體並獲得了其晶體結構，為闡釋SLA-1*0401超級型呈遞多肽的機制打下基礎。解析了黑山豬SLA-3*0202的晶體結構，確定了其多肽結合基序，並對其能夠呈遞的豬流感病毒表位進行了篩選和鑑定。另外，本研究還解析了豬CD8αα的晶體結構，分析了其與不同SLA I分子結合的結構基礎。本研究結果將推動對SLA I分子超級型的分類和豬流感病毒表位疫苗的開發的深入研究。