基本介紹
口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的以患病動物的口、蹄部出現水皰性病症為特徵的傳染性疫病。口蹄疫的特點是起病急、傳播極為迅速。除通過感染動物污染的固性物傳播外,還能以氣溶膠的形式通過空氣長距離傳播。發病率可達100%,仔豬常不見症狀而猝死,嚴重時死亡率可達100%。該病一旦發生,如延誤了早期撲滅,疫情常迅速擴大,造成不可收拾的局面,並且很難根除。控制和撲滅豬口蹄疫的有效措施是撲殺病豬和懷疑染毒豬,限制動物移動和肉品上市,因此造成嚴重的經濟損失。口蹄疫發生後,不但疫區和非疫區間的活畜和畜產品交易受到嚴格限制,更為嚴重的是畜產品國際貿易會立即斷絕,從而使有口蹄疫的國家或地區外貿收入和經濟發展遭受重大損失。 國際動物衛生組織(OIE)將該病列在15個A類動物疫病名單之首,我國政府也將其排在一類動物傳染病的第一位。
病種特徵
口蹄疫是由小核糖核酸病毒科的口蹄疫病毒引起偶蹄獸的一種急性、熱性和高度接觸性的傳染病。臨診上以豬口腔黏膜、鼻吻部、蹄部以及乳房皮膚發生水皰和潰爛為特徵。豬口蹄疫的發病率很高,傳染快,流行面大,對仔豬可引起大批死亡,造成嚴重的經濟損失,世界各國對口蹄疫都十分重視防疫,此病已成為國際重點檢疫對象。流行特點 豬對口蹄疫病毒特別具有易感性,有時牛、羊等偶蹄獸不發病,豬還能發病,不同年齡的豬易感程度不完全相同,一般是越年幼的仔豬發病率越高,病情越重,死亡率越高;豬口蹄疫多發生於秋末、冬季和早春,尤以春季達到高峰,但在大型豬場及生豬集中的倉庫,一年四季均可發生;本病常呈跳躍式流行,主要發生於集中飼養的豬場、倉庫,城郊豬場及交通沿線;畜產品、人、動物、運輸工具等都是本病的傳播媒介。
流行病學
概述
豬口蹄疫的發生和流行同樣離不開傳染源、傳播媒介、易感豬三者構成的鏈條,其流行強度、波及範圍與病毒株、宿主抵抗力和環境等多種因素有關。
傳染源
處於口蹄疫潛伏期和發病期的動物,幾乎所有的組織、器官以及分泌物、排泄物等都含有FMD病毒。病毒隨同動物的乳汁、唾液、尿液、糞便、精液和呼出的空氣等一起排放於外部環境,造成嚴重的污染,形成了該病的傳染源。
傳播方式
FMD病毒傳播方式分為接觸傳播和空氣傳播,接觸傳播又可分為直接接觸和間接接觸。目前尚未見到FMD垂直傳播的報導。
(1)接觸傳播 直接接觸主要發生在同群動物之間,包括圈舍、牧場、集貿市場、展銷會和運輸車輛中動物的直接接觸,通過發病動物和易感動物直接接觸而傳播。間接接觸主要指媒介物機械性帶毒所造成的傳播,包括無生命的媒介物和有生命的媒介物。野生動物、鳥類、嚙齒類、貓、狗、吸血蝙蝠、昆蟲等均可傳播此病。通過與病畜接觸或者與病毒污染物接觸,攜帶病毒機械地將病毒傳給易感動物。
(2)空氣傳播 FMD病毒的氣源傳播方式,特別是對遠距離傳播更具流行病學意義。感染畜呼出的FMD病毒形成很小的氣溶膠粒子後,可以由風傳播數十到百千米,具有感染性的病毒能引起下風處易感畜發病。影響空氣傳播的最大因素是相對濕度(RH)。RH高於55%以上,病毒的存活時間較長;低於55%很快失去活性。在70%的相對濕度和較低氣溫的情況下,病毒可見於100km以外的地區。
易感豬感染途徑
FMD病毒可經吸入、攝入、外傷和人工授精等多種途徑侵染易感豬。吸人和攝入是主要的感染途徑。近距離非直接接觸時,氣源性傳染(吸入途徑)最易發生。此外,不可忽視其他可能的途徑,如皮膚創傷、胚胎移植、人工自然授精等。
臨診症狀
以蹄部水皰為特徵,體溫升高,全身症狀明顯,蹄冠、蹄叉、蹄踵發紅、形成水皰和潰爛、有繼發感染時,蹄殼可能脫落;病豬跛行,喜臥;病豬鼻盤、口腔、齒齦、舌、乳房(主要是哺乳母豬)也可見到水皰和爛斑;仔豬可因腸炎和心肌炎死亡。
病原
口蹄疫病毒屬於小RNA病毒科(picornaviridae)口瘡病毒屬(aphthovirus),有7個血清型(O、A、C、 Asia1(亞洲1)、SAT1(南非1)、SAT2(南非2)和SAT3(南非3)),型間無交叉保護。每個血清型內有許多抗原性有差別的病毒株,相互間交叉免疫反應程度不等。口蹄疫病毒呈球形,無囊膜,粒子直徑28~30nm,放大150萬倍似小米粒大小。完整的病毒由衣殼包裹一個分子的RNA組成,分子量為6.9×106。電鏡下可見病毒中心是緊密團集的RNA,外裹一層約5nm薄的衣殼。衣殼呈二十面體結構,由4種結構蛋白各60個分子組成。衣殼上有高度疏水的小洞,它允許小分子如銫離子進入。這一特性決定了FMD病毒粒子有高的浮密度,在小RNA病毒中最高。完整病毒子的氯化銫浮密度為1.43g/mL,沉降係數為146S。在病毒培養物中另有3種組成各異的顆粒。無核酸的空衣殼浮密度為1.31g/mL,沉降係數為75S,分子量為4.7×106。口蹄疫病毒基因組為單股正鏈RNA,即是mRNA,又是負鏈RNA的模板,約有8500個核苷酸(nts)組成。 口蹄疫病毒對酸鹼敏感。最穩定的pH範圍為pH7.2-7.6。在此pH條件下,4℃時病毒可存活1年,22℃時存活8~10周,37℃時存活10天,56℃時存活30min。當pH低於6或高於9時,病毒很快失活。口蹄疫病毒對外界環境有較強的抵抗力,在乾糞中病毒可存活14天,在糞漿中可存活6個月,在尿水中存活39天,在地表面,夏季存活3天,冬季存活28天。口蹄疫病毒在動物組織、臟器和產品中存活時間較長。在冷凍存放中,在脾、肺、腎、腸、舌內至少存活210天。冷藏(4℃)胴體產酸能在3天內殺死病毒,但淋巴結、脊髓和大血管血凝塊的酸化程度不夠,如肌肉pH5.5時,附近淋巴結仍在 pH6以上。病毒可在淋巴結和骨髓中存活半年以上。口蹄疫病毒對酸、鹼、氧化劑和鹵族消毒劑敏感,可根據實際條件進行選用。
病原鑑定
口蹄疫病毒具有多型性的特點,發病地區必須採取水皰液和水皰皮,迅速送到指定的檢驗機構進行檢驗,才能作出確診和鑑定出病毒型,才能採取針對性強的控制措施。
鑑別診斷
概述
口蹄疫的臨診症狀主要是口、鼻、蹄、乳頭等部位出現水皰。發皰初期或之前,豬表現跛行。一般情況下主要靠這些臨診症狀可初步診斷,但表現類似症狀的還有豬水皰病、豬水皰疹(SVE)、水皰性口炎(VS)。因此,最終確診要靠實驗室診斷。
病原學診斷
1.病毒分離鑑定 病毒分離鑑定的首選病料是未破裂或剛破裂的水皰皮(液),對新發病死亡的動物可採取脊髓、扁桃體、淋巴結組織等。將病料懸液凍融2次,4℃過夜(至少4h)浸毒。以3000r/min離心15min,除菌後取上清接種細胞。或加1/3體積氯仿混合搖振數分鐘,以3000r/min離心15min,取上清液裝入試管中,加棉塞,4℃過夜,氯仿揮發後,接種單層細胞。每份樣品接種2~4瓶細胞,另設對照2~4瓶。37℃靜止培養48~72h。每天觀察記錄,對照細胞形態應基本正常或少有衰老。接種了樣品的細胞如出現FMD病毒典型病變(CPE),要及時取出並置-30℃凍存。無CPE的細胞瓶要觀察至72h,其後置於-30℃凍存作為第1代細胞/病毒液再盲傳,至少盲傳3代。凡出現CPE的樣品判定為陽性,無CPE的為陰性。為了進一步確定分離病毒的血清型,將出現CPE的細胞/病毒液用間接夾心ELISA等檢測方法定型。
2.補體結合試驗(CFT) CFT是根據抗原-抗體系統和溶血系統反應時均有補體參與的原理設計的,以溶血系統作為指示劑,限量補體測定病毒抗原。當病毒抗原與血清抗體發生特異反應形成複合物時,加入的補體因結合於該複合物而被消耗,溶血系統中沒有游離補體將不發生溶血,試驗顯示陽性。
3.病毒中和試驗(VNT) 口蹄疫病毒血清型劃分的依據是型間無交叉免疫保護性,VNT是型別鑑定的重要方法之一,其檢測結果可靠,缺點是動用活毒,且用時較長,只能在專門的實驗室中進行,無法推行於普通實驗室。
4.反向間接血凝試驗 FMD反向間接血凝試驗是將口蹄疫病毒抗體以化學方法偶聯於醛化的綿羊紅細胞上,當貼附於血細胞上的抗體與游離的抗原相遇時,形成抗原抗體凝集網路,綿羊紅細胞也隨之凝集,出現肉眼可見的紅細胞凝集現象。反向間接血凝試驗可作為FMD病毒抗原型別鑑定的初步方法,該方法簡便、快捷,適合于田間使用。
5.反轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR) PCR具備實驗診斷所要求的最重要的3個要素:①敏感,可將原樣品放大上百萬倍,使原本少得難以探察到的(Pg級)樣本擴增到能在紫外燈下肉眼可見;②特異,核酸片段與引物間的序列互補,使反應呈高度特異;③操作簡單快速。RT-PCR檢測的目標物是FMD病毒的RNA,通常以病毒材料為被檢樣品,可對各種動物組織和細胞來源的病毒材料進行檢測,擴增到的PCR片段測定核苷酸序列後,可以確定所屬的基因型和基因亞型,進而追蹤疫源。
6.間接夾心ELISA 國際口蹄疫參考試驗室建議,檢測口蹄疫病毒血清型應優先採用間接夾心ELISA,OIE和FAO也一致推薦使用該方法定型診斷。
抗體檢測
通過檢測動物體液中(主要是血清)特異性抗體,可對FMD病毒感染與免疫狀況做出診斷,通常採用病毒中和試驗和
ELISA方法,這兩種方法也是國際貿易中指定方法。FMD病毒抗體檢測可用於以下幾個目的:①診斷急性感染,用同一試驗檢測急性期和康復期豬血清樣品,血清抗體陰轉陽或抗體滴度急劇上升表示發生了感染,但診斷的前提是豬無疫苗接種史;②證實豬未被感染,用於國際貿易;③在流行病學調查中檢測感染情況;④支持疫病撲滅計畫和後期檢測;⑤接種疫苗後效價測定。值得提示的是免疫豬有時抗體滴度很低,甚至檢測不到抗體,但攻毒後仍能保護。
新診斷技術進展
FMD診斷檢測技術正在不斷地改進和創新,已從血清學診斷技術領域擴展到了分子生物學診斷技術領域。這些新技術的最大優點體現在簡便、快速、精確、靈敏以及高通量化。
防治措施
前言
國內外對口蹄疫防治積累了豐富經驗,以下五項措施證明是有效的:
撲殺病畜及染毒動物
撲殺動物的目的是消除傳染源,病毒是最主要的傳染源,其次是隱性感染動物和牛、羊等持續性感染帶毒動物。疫情發生後,可根據具體情況決定撲殺動物的範圍,撲殺措施由寬到嚴的次序可為病畜→病畜的同群畜→疫區所有易感動物。
免疫接種
目的是保護易感動物,提高易感動物的免疫水平,降低口蹄疫流行的嚴重程度和流行範圍。現行油佐劑滅活疫苗的注射密度達80%以上時,能有效遏制口蹄疫流行。疫苗接種可分為常年計畫免疫、疫區周圍環狀免疫和疫區單邊帶狀免疫。實施免疫接種應根據疫情選擇疫苗種類、劑量和次數。常規免疫應保證每年2~3次,每頭份疫苗含3PD50以上。緊急預防應將每頭份疫苗提高到6 PD50,並增加免疫次數。
限制動物、動物產品和其他染毒物品移動
目的是切斷傳播途徑。小到一個養豬戶,大到一個國家,要想保持無口蹄疫狀態,必須對上述動物和物品的引入和進口保持高度警惕。疫區必須有全局觀念,其易感動物及其產品運出是疫情擴散的主要原因。
動物衛生措施
疫區除對場地嚴格消毒外,還要關閉與動物及產品相關的交易市場。
流行病學調查
包括疫源追溯和追查易感動物及相關產品外運去向,並對之進行嚴密監控和處理