基本介紹
- 中文名:諾森印跡法
- 外文名:Norson blotting
- 命名:南、北兩個方向命名
- 區分:將DNA和RNA的分析法區分
- 電泳:用瓊脂糖或聚丙烯醯胺凝膠電泳
- 原因:RNA是單鏈分子,所以不用變性
簡介,核酸分子雜交,雜交方法,
簡介
類似於索森印跡法。其命名不是創始者的姓名,而是巧用南、北兩個方向命名,將DNA和RNA的分析法區分開來,由索森法引伸出來的名稱。它是將RNA分子用瓊脂糖或聚丙烯醯胺凝膠電泳分離再吸印到硝酸纖維膜(或重氮苲甲基;DBM纖維膜)上,因RNA是單鏈分子,所以不用變性,直接與單鏈核酸分子探針雜交。
核酸分子雜交
根據異源單鏈核酸分子間因結構互補發生共價鍵結合,能形成互補雜合雙鏈,而進行分子遺傳學研究的一種技術。雙鏈核酸分子加熱至80~100℃時,鹼基對之間的氫鍵斷開,形成兩條單鏈,這一過程叫作核酸的變性作用或解鏈。變性的核酸分子慢慢冷卻,互補的鹼基對之間又會重新形成雙鏈分子,這一過程叫作核酸的復性作用或退火。核酸分子在pH〉10和pH〈3的環境中也會變性,當條件適合時又可復性。核酸分子雜交技術是基於核酸變性與復性的原理。
雜交方法
核酸分子雜交有液相和固相兩種方法。液相法的核酸單鏈分子都在溶液中,通過分子運動進行雜交固相法是將一種核酸單鏈固定在不溶性的介質上。另一種核酸單鏈在溶液中與固定的核酸分子進行雜交。常用的固相介質有硝酸纖維膜、尼龍纖維膜、瓊脂糖和聚丙烯醯胺凝膠等。