《調節性Exosome對免疫耐受的誘導作用及其機制研究》是依託浙江大學，由蔡志堅擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：調節性Exosome對免疫耐受的誘導作用及其機制研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：蔡志堅
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
機體免疫耐受平衡被打破是造成自身免疫性疾病的主要因素。研究表明經免疫抑制基因修飾的小鼠骨髓樹突狀細胞來源的Exosomes具有免疫抑制功能。TGF-beta1是一種強有力的調節性細胞因子，在機體免疫耐受的維持中發揮著重要作用。因此我們推測，TGF-beta1基因修飾的小鼠骨髓imDC(immature dendritic cells,imDC)來源的Exosomes極有可能具有較強的免疫抑制功能，能誘導機體免疫耐受的重建。本項目利用免疫抑制基因TGF-beta1修飾的小鼠骨髓imDC來源的調節性Exosomes治療EAE和IBD自身免疫病模型小鼠，評價調節性Exosomes是否能夠誘導機體的免疫耐受的重建從而對自身免疫病發揮治療作用，並對其相關的機制進行探討。本課題的研究將為自身免疫性疾病的治療提供新的思路。
結題摘要
本項目有兩部分工作。第一部分研究工作中，我們製備了分泌型TGF-β1基因修飾的樹突狀細胞（DC）來源的Exosomes（sTGF-β1-EXO），發現sTGF-β1-EXO能在體外抑制T細胞增殖。在葡聚糖硫酸鈉鹽誘導的小鼠炎症性腸病模型中，sTGF-β1-EXO能延緩小鼠疾病進展。sTGF-β1-EXO治療的炎症性腸病小鼠腸系膜而非脾臟來源的淋巴細胞中，我們檢測到CD4+Foxp3+調節性T細胞（Tregs）比例明顯升高，此外，治療小鼠結腸組織與血清中IL-17和IL-23的水平明顯降低。如用抗CD25抗將Tregs刪除，sTGF-β1-EXO的治療效果基本消失。以上結果說明sTGF-β1-EXO具明顯的免疫抑制功能，能延緩炎症性腸病的進展，而該作用是通過sTGF-β1-EXO誘導的Tregs所介導。在第二部分研究工作中，我們製備了膜相關TGF-β1基因修飾的DC來源的Exosomes（mTGF-β1-EXO）並發現與sTGF-β1-EXO相比，mTGF-β1-EXO在體外具有更強的免疫抑制潛能及誘導Treg的能力。mTGF-β1-EXO和sTGF-β1-EXO均能預防MOG肽誘導的小鼠實驗性自身反應性腦脊髓炎（EAE）發病，但只有mTGF-β1-EXO對已發病EAE小鼠有明顯的治療效果。mTGF-β1-EXO治療能明顯抑制MOG肽誘導的EAE小鼠來源的脾臟和CD4+ T淋巴細胞的增殖並能明顯增加EAE小鼠腹股溝和脾臟淋巴細胞中Treg的比例。過繼回輸mTGF-β1-EXO治療EAE小鼠來源的CD4+CD25+ Treg能夠明顯減輕新誘導的EAE小鼠發病情況。進一步的研究表明，mTGF-β1-EXO能抑制DC中IL-6的分泌水平，而有效的減少Th17分化，這與mTGF-β1-EXO能抑制DC中p38, ERK, STAT3和NF-κB等信號分子的磷酸化有關。此外，C57小鼠來源的mTGF-β1-EXO能夠在體外明顯的抑制BALB/c小鼠來源的T細胞增殖。C57小鼠來源的mTGF-β1-EXO也能有效的治療PLP誘導的Balb/c小鼠EAE。這說明mTGF-β1-EXO與sTGF-β1-EXO相比，具有更強大的免疫抑制效應，能有效治療EAE而不受MHC限制。我們的研究結果說明，TGF-β1基因修飾的DC來源的Exosomes能作為廣譜的疫苗，用於自身免疫性疾病的治療。
