《調控惡性腫瘤細胞端粒穩定的miRNAs研究》是依託武漢大學，由陳始明擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：調控惡性腫瘤細胞端粒穩定的miRNAs研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：陳始明
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
惡性腫瘤細胞區別於正常細胞最大的特點之一是其端粒能夠維持穩定從而克服Hayflick極限，獲得無限增殖能力。最近研究發現microRNAs（miRNAs）在腫瘤的發生髮展中起著重要作用。理論上分析某些特異miRNAs的異常表達跟惡性腫瘤細胞端粒的穩定有密切關係。本項目以頭頸鱗癌為基礎，根據其端粒維持機制不同分為端粒酶途徑及ALT途徑二種類型的腫瘤細胞，分別與正常細胞比較，套用microRNA晶片初步篩選出各自特異的差異miRNAs，然後套用實時定量RT-PCR技術驗證這些差異miRNAs。進一步套用miRNAs表達載體過表達或者反義ASO片段抑制相應腫瘤細胞中特異miRNAs，檢測腫瘤細胞端粒長度、端粒結構及生物學行為變化，最後得出調控惡性腫瘤端粒穩定的特定miRNAs。本研究從miRNAs水平探討惡性腫瘤端粒維持機制，有望開闢一條以miRNAs為基礎的、以端粒為靶向的惡性腫瘤治療新途徑。
結題摘要
端粒酶陽性的Hep-2、CNE1細胞hTERT抑制以後，端粒酶活性減低，90%的細胞凋亡，剩餘的10％細胞仍能繼續存活，其端粒維持機制為ALT機制；其增殖能力、侵襲轉移及成瘤能力均顯著受到抑制。套用Targetscan、PITA、miRanda軟體分別預測可能參與調控hTERT的miRNAs各有數個，但是相同的miRNAs僅有三個：分別是miR-299-3p、miR-138、miR-886-3p。取miR-299-3p進行研究發現，喉癌Hep-2細胞中miR-299-3P表達陽性，轉染miR-299-3p模擬物後hTERT mRNA顯著高表達，具有劑量依賴關係。證實miR-299-3p可以直接調控hTERT的表達，是一個明顯的促癌因素。另外，本項目發現Notch信號通路與端粒酶的關係密切；抑制其表達可以明顯降低腫瘤細胞端粒酶活性，其具體機制有待進一步研究。本項目主要對miRNAs調控腫瘤細胞端粒穩定，進而對其生物學行為的影響進行了研究，完成了既定目標，達到預期目的，並在實驗過程中發現了調控端粒酶活性的新途徑，為腫瘤端粒靶向治療開拓了新思路。
