誘導性基因打靶

誘導性基因打靶主要由Cre-LoxP及誘導系統組成。Cre-loxP系統由重組酶Cre和該酶的特定作用位點LoxP組成,其中的重組酶Cre可誘導LoxP所在的DNA發生缺失、插入、重複、倒位和易位等多種形式的基因突變或染色體畸變。

基本介紹

  • 中文名:誘導性基因打靶
  • 組成:Cre-LoxP及誘導系統
  • Cre-lox:重組酶Cre和該酶的特定作用位點
  • 重組酶Cre:誘
原理,類型,優勢,

原理

誘導性基因打靶就是以該系統為基礎、利用控制Cre表達的啟動子的活性或所表達的Cre酶活性具有可誘導的特點,通過對誘導劑給予時間的控制、或利用Cre基因定位表達系統中載體的宿主細胞特異性和將該表達系統轉移到動物體內的過程在時間上的可控性、從而在LoxP動物的一定發育階段和一定組織細胞中實現對特定基因進行遺傳修飾之目的的基因打靶技術。

類型

根據所用誘導劑的種類,誘導性基因打靶可分為四環素誘導型、干擾素誘導型(二者所用誘導劑為控制Cre基因表達的啟動子活性的活化物)和激素誘導型(所用誘導劑為Cre酶活性的激活物)等幾種類型。而對由病毒或配體/DNA等載體介導的Cre定位表達系統來說,如果其Cre基因的表達或其目的產物Cre酶活性並不需要誘導劑的存在,那么嚴格說來它並不屬於誘導性基因打靶的範疇。反之,則不失為一種不錯的誘導性基因打靶策略,並且它因為不用建立Cre的表達或Cre的酶活性具有可誘導特性的轉基因動物而可使成本降低。

優勢

總之,以Cre-LoxP系統介導的位點特異性重組為基礎的誘導性基因打靶術的確有其優勢:
①誘導基因突變的時間可人為控制;
②可避免因基因突變而致死胎的問題;
③在2個LoxP位點之間的重組率較高;
④如用病毒或配體/DNA複合物等基因轉移系統來介導Cre的表達,則可省去建立攜帶Cre的轉基因動物的過程。
如果在Cre-ERT和Ad-Cre表達系統中採用組織細胞特異的啟動子來控制Cre的表達,其誘導的基因重組的組織細胞特異性還可進一步提高。

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