親和超濾

親和超濾是將連有特異性配基的載體與目標蛋白粗提液混合，特異性地與溶液中的目標物給合，形成體積及分子量遠大於雜蛋白的複合物。

基本介紹

• 中文名：親和超濾
• 原理：特異性結合，過濾分離
• 特點：簡單,快速等
• 分類：科學

原理

超濾時,複合物被濾膜截留,而雜質則透過膜被除去,然後,用合適的洗脫劑將結合的目的物洗脫下來, 再通過超濾,該目標物透過膜而得到分離純化的產品,親和載體則被截留循環使用。

親和層析特點

（1）簡單,快速,

（2）回收率和純化倍數高

（3）配基對相對應的蛋白質一般有穩定作用

（4）親和性吸附劑可反覆使用。

（5）層析柱中流動狀況複雜,凝膠顆粒內傳

質阻力大,達到吸附平衡的時間長

（6）親水性載體的機械強度低，放大困難,處理量小

與親和層析比較

a.吸附：

親和超濾：在全混攪拌, 大體積，稀物料，吸附容量大。

親和層析：小部分目標物與親和載體在頂部接觸。多孔性載體反應速度慢,達平衡時間長。優點是相當於多個理論塔板數，用於被純化產物濃度高,體積小時

b.沖洗:

親和超濾：要求更大的沖洗體積,可在較短的時間內完成沖洗操作。其缺點是沖洗期間產物損失較大。

親和層析：在淋洗階段需要較長的時間,但所需淋洗緩衝液體積較少。

c.洗脫:

親和超濾:親和超濾易於大體積快速操作, 產物濃度稀,需增加超濾單元用於濃縮.

親和層析: 洗脫與再生速度取決於柱結構與流動狀況，需要較長時間