補體激活在急性肝衰竭SPHK1活化中機制研究

《補體激活在急性肝衰竭SPHK1活化中機制研究》是依託南昌大學，由雷延昌擔任項目負責人的地區科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：補體激活在急性肝衰竭SPHK1活化中機制研究
• 項目類別：地區科學基金項目
• 項目負責人：雷延昌
• 依託單位：南昌大學

項目摘要

在前期工作發現SphK1在急性肝衰竭發病中具有重要作用，是HMGB1上游調控分子。MHV-3感染小鼠急性肝衰竭模型存在補體激活，CVF清除補體下調SphK1水平，補體激活可能是SphK1活化的始動因素的基礎上，進一步研究補體激活在MHV-3感染和D-GalN/LPS誘導急性肝衰竭小鼠以及急性肝衰竭患者發病中的作用和急性肝衰竭補體激活途徑，急性肝衰竭補體激活與Sphk上調的關係，探究急性肝衰竭肝臟C5a通過C5L2和CD88受體調控SphK1的機制。進一步弄清補體激活及其途徑在肝衰竭發生和調控Sphk1的機制，為肝衰竭的治療提供新的干預靶點。

結題摘要

近年來發現，補體激活在急性肝衰竭(ALF)中發揮重要作用。我們的前期研究發現SphK1在ALF發病中具有重要作用，ALF存在補體激活，CVF 清除補體下調SphK1，進一步研究補體激活上調SphK1的機制。 本項目建立和最佳化D-GalN/LPS和對乙醯氨基酚ALF兩種小鼠模型，上述模型和慢加亞急性肝衰竭早期患者補體高度激活，表現為血漿C3水平降低、補體活化產物C3a和C5a水平升高、肝臟C3aR和C5aR的mRNA水平增加。CVF預處理部分清除補體顯著降低血清C3a、C5a水平和肝臟C3aR、C5aR的mRNA表達，顯著降低血清ALT/AST、炎症因子（TNF-a、IL-β、IL-6）和HMGB1水平，減輕肝臟炎症壞死和HMGB1肝細胞質移位，提高生存率和促進急性肝衰竭肝細胞再生。 補體經典途徑的激活物和成分免疫複合物水平和C1q水平在ALF小鼠和慢加亞急性肝衰竭患者無明顯變化。補體旁路激活途徑抑制劑CR2-FH預處理降低急性肝衰竭12h血清C3a和C5a峰值水平、C3aR和C5aR的mRNA表達和肝臟補體C3b沉積，降低血清ALT/AST、炎症因子、HMGB1、肝臟炎症壞死和死亡率。伴隨補體激活，肝臟SphK1表達升高，CVF清楚補體下調肝臟SphK1表達。 SphK1基因敲除降低PBMC和腹腔巨噬細胞LPS刺激的C5L2表達，而對CD88表達無影響，表明SphK1對LPS刺激小鼠巨噬細胞或PBMC的C5L2表達具有重要作用。阻斷C5a/C5aR 通路降低D-GalN/LPS 誘導ALF的肝損傷和提高生存率，下調D-GalN/LPS誘導ALF肝臟和C5a刺激巨噬細胞的SphK1表達。C5a/C5aR 通路誘導巨噬細胞SphK1表達通過p38 MAPK 活化。 ALF小鼠肝臟iRhom2高表達，siRNA下調iRhom2表達保護ALF肝損傷。C5aRa阻斷C5a/C5aR通路下調ALF和C5a刺激腹腔巨噬細胞iRhom2表達，C5a/C5aR 通路誘導的iRhom2表達通過p38-MAPK活化。 綜上所述，補體激活特別是旁路途徑激活上調SphK1在ALF發病具有重要作用，補體活化產物C5a通過C5a/C5aR通路激活p38-MAPK磷酸化上調SphK1和iRhom2表達,為ALF治療提供新的干預靶點。