葛根素經miR-34a靶向調節PLGF治療放射性肺損傷

《葛根素經miR-34a靶向調節PLGF治療放射性肺損傷》是依託蘇州大學，由賀永明擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：葛根素經miR-34a靶向調節PLGF治療放射性肺損傷
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：賀永明
• 依託單位：蘇州大學

項目摘要

放射性肺損傷是胸部腫瘤放療中常見的併發症和難題，其發生機制與射線所誘發的血管損傷，尤其是微血管損傷後引起的微循環障礙有關。現有研究證實，miR-34a是輻射損傷防護的關鍵靶點；胎盤生長因子( PLGF)系miR-34a的靶基因，參與了血管功能和血管內皮生長的調節。我們的預實驗結果提示，葛根素可調節血管內皮細胞miR-34a的表達，減輕血管內皮細胞的放射性損傷，又未削弱腫瘤放療的療效。為此，我們提出假說：葛根素通過miR-34a靶向作用PLGF治療放射性肺損傷。為驗證這一假說，我們將利用人血管內皮細胞、基因敲除小鼠及放射性肺炎患者，採用螢光定量 PCR、Western blot、免疫組化等手段，從分子、細胞、動物整體水平多層次探討葛根素治療放射性肺損傷的機制。本研究將闡明葛根素治療放射性肺損傷的功效和機制，為開發具有自主智慧財產權的輻射損傷防治藥物提供重要的理論依據。

結題摘要

放射性肺炎是臨床放療中常見的併發症和難題，而血管損傷可能是其始動因素。本課題測定了不同照射劑量和不同葛根素濃度處理後各組細胞的活性，最終確定以10Gy的X射線照射，經20umol/L葛根素注射液處理48小時為最佳處理方案，構建葛根素抑制血管內皮細胞放射性損傷的模型。檢測細胞凋亡和細胞DNA損傷修復，以及細胞內miR-34a和PGF的表達。雙螢光素酶實驗驗證PGF為miR-34a的靶調節基因。此外，檢測放療病人血液中miR-34a和PGF的表達。建立放射性肺損傷模型動物，觀察葛根素的防治效果。結果表明，照射後予葛根素處理可明顯降低X射線對HUVEC細胞的造成的凋亡和DNA損傷。X射線照射後血管內皮細胞中的miR-34a表達量上升，而葛根素可降低該上升幅度。同樣，X射線可以使細胞中PGF的mRNA的表達量增加，葛根素處理可使PGF的表達量進一步上升。雙螢光素酶實驗證實PGF為miR-34a的靶基因。隨著放療累積劑量的增加，放療患者血液中miR-34a的表達量逐漸增加，而PGF的表達量在第4周的時候開始下降，並直到放療結束，一直處於較低的水平。小鼠胸部照射8.5Gy後不同時間，肺部出現炎症浸潤和出血等放射性肺損傷，葛根素可明顯減輕肺部損傷症狀，起到防治作用。可見，葛根素通過調節miR-34a靶向作用PGF，抑制照射誘發的血管內皮細胞DNA損傷和凋亡，從而防治放射性肺損傷。本課題明確葛根素防治放射性肺損傷的作用和機制，為其作為一種可能的輻射防護藥物從而用於放療患者的輔助治療提供了理論依據。