《菸草病毒的測定逆轉錄-聚合酶鏈反應法》是2011年10月15日實施的一項行業標準。
基本介紹
- 中文名：菸草病毒的測定逆轉錄-聚合酶鏈反應法
- 實施日期：2011-10-15
- 標準號：YC/T 365-2010
- 發布日期：2010-10-11
- 批准發布部門：國家菸草專賣局
- 技術歸口：全國菸草標準化技術委員會
起草單位,起草人,
起草單位
中國菸草總公司黑龍江省公司牡丹江菸草科學研究所。
起草人
顏培強、武常青。
《菸草病毒的測定逆轉錄-聚合酶鏈反應法》是2011年10月15日實施的一項行業標準。
《菸草病毒的測定逆轉錄-聚合酶鏈反應法》是2011年10月15日實施的一項行業標準。起草單位中國菸草總公司黑龍江省公司牡丹江菸草科學研究所。起草人顏培強、武常青。...
《中華人民共和國菸草行業標準:菸草病毒的測定 逆轉錄 聚合酶鏈反應法(YC/T 365-2010)》由國家菸草專賣局提出。本標準由全國菸草標準化技術委員會農業分技術委員會（SAC/TC 144/SC 2）歸口。本標準起草單位：中國菸草總公司黑龍江省公司牡丹江菸草科學研究所。本標準主要起草人：顏培強、武常青、閆新甫、萬秀清、...
逆轉錄聚合酶鏈反應 逆轉錄聚合酶鏈反應是2008年公布的生物化學與分子生物學名詞。定義 先將RNA通過逆轉錄酶的作用合成與之互補的DNA鏈，再以該鏈作模板進行聚合酶鏈反應擴增特定RNA序列的方法。出處 《生物化學與分子生物學名詞》。
（3）逆轉錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）：RT-PCR技術通過對RNA逆轉錄酶的套用實現，即將病毒RNA逆轉錄DNA，接著進行PCR，與PCR相比多了逆轉錄的過程，臨床主要運用於RNA病毒檢測，也可用於基因表達、轉錄水平等檢測。2.定量檢測 （1）實時定量螢光聚合酶鏈反應（Real-time PCR）：以螢光探針或螢光染料發出的螢光信號...
RT-PCR的關鍵步驟是在RNA的反轉錄，要求RNA模版為完整的且不含DNA、蛋白質等雜質。常用的反轉錄酶有兩種，即鳥類成髓細胞性白細胞病毒（avian myeloblastosis virus，AMV）反轉錄酶和莫羅尼鼠類白血病病毒（moloney murine leukemia virus，MMLV）反轉錄酶。在完成逆轉錄過程之後，通過PCR進行定量分析的時候，隨著技術的...
逆轉錄過程由逆轉錄酶催化，此酶也稱依賴RNA的DNA聚合酶（RDDP），即以RNA為模板催化DNA鏈的合成。合成的DNA鏈稱為與RNA互補DNA（complementary DNA, cDNA）。逆轉錄酶在生物界存在於逆轉錄病毒以及真核細胞（如端粒酶）中，逆轉錄病毒沒有單獨的逆轉錄酶，其DNA聚合酶帶有逆轉錄酶的活性，可能與病毒的惡性轉化有關...
binds, initiating the transcription of messenger RNA.啟動區和核糖核酸聚合酶相結合的脫氧糖核酸分子，它引起核糖核酸信使的轉錄 10.a polymerase that catalyzes the formation of DNA using RNA as a template; found especially in retroviruses.一種催化rna模板上的dna形成的聚合酶，尤其在逆轉錄酶病毒中發現。
反轉錄PCR 實時螢光定量PCR 免疫PCR 利用PCR構建突變體 未知序列的克隆 目錄 原理篇 第1章 PCR技術基本原理 1.1 基本原理 1.2 PCR反應動力學 1.3 PCR技術的特點 1.4 PCR反應體系的組成 1.5 PCR所需設備和器材 參考文獻 第2章 PCR技術的發展 2.1 PCR新技術的發展 2.2 其他核酸擴增技術的發展 ...
《鯉春病毒血症病毒(SVCV)逆轉錄-聚合酶鏈式反應(RT-PCR)檢測方法(SN/T 1152-2002)》是在總結我國在這一領域的實踐經驗並參考國際上有關檢測規程的基礎上制定的。本標準的附錄A是資料性附錄。本標準由國家認證認可監督管理委員會提出並歸口。本標準起草單位：中華人民共和國深圳出入境檢驗檢疫局。本標準主要起草人...
反轉錄酶(reverse transcriptase,也可寫成逆轉錄酶) 又稱為依賴RNA 的DNA 聚合酶。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中發現了一種特殊的DNA 聚合酶，該酶以RNA 為模板，以dNTP 為底物，tRNA( 主要是色氨酸tRNA) 為引物，在tRNA 3'-OH 末端上，根據鹼基配對的原則，按5'-3'方向合成一條與RNA ...
RNA病毒的抵抗力普遍比DNA病毒弱，治癒也更容易。但也有例外，例如雙鏈RNA病毒的抵抗力就很強，逆轉錄病毒的治癒就極其困難。常見的RNA病毒有：愛滋病病毒（為逆轉錄病毒），C型肝炎病毒，乙型腦炎病毒，全部流感病毒，鼻病毒，脊髓灰質炎病毒，柯薩奇病毒，登革熱病毒，輪狀病毒，菸草花葉病毒，SARS 病毒，MERS病毒...
差示式聚合酶鏈反應是利用組織細胞間基因表達的差異並結合聚合酶鏈反應技術來篩選和克隆新基因的方法。即先主觀設定一對引物(稱武斷引物)，提取兩種或多種待比較細胞的mRNA，用3′端武斷引物逆轉錄成cDNA，再PCR擴增，產物用凝膠電泳顯示，逐一比較來自各細胞PCR的條帶差異，回收差異條帶，進行兩次PCR，再通過雜交等...
又稱RNA指導的DNA聚合酶，是以RNA為模板合成DNA的酶。這種酶是1970年美國科學家特明(H.M.Temin)和巴爾的摩(D.Baltimore)分別於動物致癌RNA病毒中發現，他們並因此獲得1975年度諾貝爾生理學或醫學獎。當RNA致癌病毒，如鳥類勞氏肉瘤病毒(Roussarcomavirus)進入宿主細胞後，其逆轉錄酶先催化合成與病毒RNA互補的DNA單鏈，...
鏈式(聚合)反應。1ain-ractir polymerizatimn稱鏈鎖(聚合)反應_在聚合反應過程中，有活性中心(自由基或離子)形成，巨_可以在很短的時間內，使許多單體聚合在一起，形成分子量很大的大分子的反應。是聚合反應的大種類.主要包括二個基元反應，即鏈引發、鏈增長和鏈終有才還伴隨有鏈轉移反應發生。按鏈活性r'『心...
3.丁型肝炎病毒RNA測定 血清丁型肝炎病毒RNA 採用cDNA探針斑點雜交法進行檢測，肝組織內丁型肝炎病毒 RNA 採用原位雜交或轉印雜交法檢測，逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）已廣泛用於丁型肝炎病毒 RNA的檢測。正常值參考範圍 測定結果均呈陰性。臨床意義 1.丁型肝炎病毒抗原測定 丁型肝炎病毒抗原出現較早，但僅持續1...
然而，在解釋嬰兒小頭症與寨卡病毒之間的關係之前仍需要做出更多調查。診斷 寨卡病毒感染以症狀和流行病史為診斷基礎（比如，蚊子叮咬，或者到已知存有寨卡病毒的地區旅行）。由於寨卡病毒與登革熱、西尼羅河病毒和黃熱病等其他黃病毒會發生交叉反應，因此通過血清學方法做出診斷可能較為困難。逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）...
套用人胎肝細胞研究核糖核酸酶P的M1-RNA 研究抗組織相容性複合物(MHC)Ⅱ類分子轉錄激活因子(CⅡTA)核糖核酸酶P(RNaseP)抑制肝細胞表面MHCⅡ分子的表達。方法 ：M1—RNA是RNaseP的催化活性單位，設計並克隆針對CⅡTA第629位點的M1—RNA(M1—629—GS)及其對應的CⅡTA靶序列，分別插入腺相關病毒載體psNAV(psNAV...
病毒是一類比較原始的、有生命特徵的、能夠自我複製和嚴格細胞內寄生的非細胞生物。其含義是隨著人們對病毒本質認識的不斷深入而不斷加深，大慨經歷過以下幾個比較重要的階段：1.1892年Ivanofsky因發現菸草花葉病毒(TMV)時，稱其為濾過性致病因子 2.1957年Lwoff.A因病毒複製周期的闡明以及一些病毒的細胞培養技術的...
非結構蛋白的切割由水解酶作用完成。另一方面，在NS5聚合酶的作用下，首先以病毒基因組RNA為模板合成負鏈RNA，再由負鏈RNA複製合成子代病毒基因組+ssRNA。最後，病毒的+ssRNA和衣殼蛋白C在細胞漿中裝配成病毒核衣殼後，通過出芽釋放的形式獲得含有膜蛋白M和包膜蛋白E的病毒包膜，形成完整的病毒顆粒。培養特性 登革病毒...
國內也有人運用GeXP-PCR對HPV進行檢測，如蘆春斌，楊夢婕等人利用該技術對5種不同亞型的HPV病毒進行檢測鑑別。胃腸道傳播疾病方面研究如與手足口病的腸道病毒相關的檢測。已有的檢測方法有實時逆轉錄-聚合酶鏈式反應（RT-PCR）、內嵌套式PCR、限制性片段長度多態性-聚合酶鏈式反應（PCR-RFLP），這些方法都能夠鑑別不同...
HLA-G與病毒感染據認為HLA-G分子可與病毒來源的抗原肽結合,並把它們遞呈給母體免疫系統,引起被感染胎兒組織溶解.因此,它可能在人類巨細胞病毒(humancy-tomegalovirus,CMV)感染中發揮一定作用,與習慣性流產有關.已有報導顯示,兩個患有習慣性流產的婦女是無效等位基因HLA-G*0105N的純合子.人類CMV可調節HLA-G表達,...
分子雜交是基因探測的基礎，除了用印跡雜交外，還有斑點雜交法。即將DNA樣品變性後直接點在硝酸纖維濾膜上，再與探針雜交，或者將細胞或病毒點在膜上，菌落或菌斑原位地吸附在膜上，經過變性處理，再進行雜交。斑點雜交多用於病原體基因，如微生物的基因，但也可用於檢查人類基因組中的DNA序列。聚合酶鏈反應 21世紀...
一、逆轉錄病毒感染法 二、顯微注射法 三、胚胎幹細胞介導法 四、精子載體法 五、體細胞核移植技術 六、人工酵母染色體法 第二節 基因工程小鼠的遺傳修飾策略 一、導致功能獲得的基因組修飾 二、導致功能缺失的基因組修飾 三、Cre／LoxP系統介導的條件性基因組修飾 四、導致基因替換的基因組修飾 第三節 基因...
是指遺傳信息從DNA傳遞給RNA，再從RNA傳遞給蛋白質，即完成遺傳信息的轉錄和翻譯的過程。也可以從DNA傳遞給DNA，即完成DNA的複製過程。這是所有有細胞結構的生物所遵循的法則。在某些病毒中的RNA自我複製（如菸草花葉病毒等）和在某些病毒中能以RNA為模板逆轉錄成DNA的過程（某些致癌病毒）是對中心法則的補充。中心...
其中一組研究人員開發了逆轉錄病毒cDNA表達庫用於篩選新癌基因。他們轉染了提取自一位預先篩選顯示KRAS和EGFR突變陰性的62歲日本男性吸菸者肺腺癌的cDNA文庫，並設計生成了轉基因小鼠，在肺泡細胞中特異性表達EML4-ALK，由此生成了許多肺腺癌結節。使用ALK抑制劑治療這些轉基因小鼠導致腫瘤負荷相比於未治療的小鼠減小。大...
拓展閱讀 1989年諾貝爾生理學或醫學獎：逆轉錄病毒癌基因及其細胞起源 80 實驗七 細胞內鹼性蛋白質和酸性蛋白質的顯示 80 拓展閱讀 1994年諾貝爾生理學或醫學獎：G蛋白及其在細胞轉導中的作用 82 實驗八 細胞內過氧化物酶的顯示 82 實驗九 過碘酸希夫反應（PAS） ——顯示細胞內糖原 84 拓展閱讀 1997年...