《荔枝果肉中致炎症物質的分離鑑定及其作用機制研究》是依託華南農業大學，由楊瑞麗擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：荔枝果肉中致炎症物質的分離鑑定及其作用機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：楊瑞麗
- 依託單位：華南農業大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
荔枝（Litchi chinensis Sonn.）是我國著名的嶺南佳果，營養滋補價值高，但食用荔枝易引起炎症性上火症狀，對消費者健康存在潛在危險。目前荔枝引起炎症反應的物質基礎及其機理未見報導，本課題擬採用小鼠巨噬細胞J774體外炎症模型及活性跟蹤法，對荔枝果肉中誘導炎症反應的化學成分進行提取分離純化，套用HPLC-MS，HRMS、IR、NMR等技術對其結構進行鑑定，進而初步探討活性成分誘導炎症反應的機理，在體外，研究活性成分對巨噬細胞J774自由基水平，細胞內Ca2+，核因子κB（NF-κB）和磷酸化p38MAPK蛋白表達，NF-κB DNA結合活性，環氧化酶-2基因表達以及PGE2分泌的影響，在體內，觀察活性成分對機體炎症介質分泌的影響，同時，利用基因晶片研究其對炎症相關信號通路基因表達譜的影響。對於認識與解決荔枝誘導炎症性上火有重要的理論與實踐意義。
結題摘要
荔枝（Litchi chinensis Sonn.）是我國著名的嶺南佳果，營養滋補價值高，但食用荔枝易引起炎症性“上火”症狀，本研究利用小鼠巨噬細胞模型，通過活性跟蹤法分離鑑定引起炎症反應的活性物質，並初步探討其作用機制，研究結果如下：（1）採用荔枝果肉不同溶劑粗提物孵育巨噬細胞J774，結果發現乙酸乙酯部粗提物在100－900μg/mL時可以顯著提高巨噬細胞炎症因子前列腺E-2（PGE2）和NO的水平（P<0.05），石油醚、正丁醇、水部粗提物對巨噬細胞PGE2、NO含量無顯著影響（P>0.05）；（2）採用柱層析分離乙酸乙酯部粗提物，並進行重結晶，通過氣質聯用與核磁共振對得到的晶體化合物進行鑑定，分別是：苯甲醇、氫化安息香、5-羥甲基糠醛、香葉醇、苯乙醇、香草醇、苯甲酸、2-甲氧基-5甲基苯酚和檸檬醛；（3）分別研究9種單體化合物對巨噬細胞J774炎症因子NO、PGE2水平以及環加氧酶（COX-2）、誘導型一氧化氮合酶（iNOS）基因表達和細胞NF-κB蛋白表達的影響，結果顯示，苯甲醇、氫化安息香、5-羥甲基糠醛、香葉醇、苯乙醇、香草醇6種化合物可以不同程度的誘導巨噬細胞NO、PGE2等炎症因子的分泌，其中苯甲醇的活性最強。在1.1-8.5μg/mL範圍內，苯甲醇能夠刺激巨噬細胞NF-κB/p50表達，誘導IκB降解，並呈現濃度劑量效應。同時，487.5μg/mL氫化安息香和125μg/mL 5-羥甲基糠醛也具有刺激巨噬細胞NF-κB/p50表達，誘導IκB降解的能力。（4）採用Affymetrix 基因晶片，研究乙酸乙酯部粗提物對巨噬細胞炎症相關基因表達譜的影響，結果發現巨噬細胞回響基因的生理功能主要涉及免疫反應、RNA代謝、信號轉導、氮化合物代謝等，能夠激活NF-κB和MAPK信號通路；（5）採用灌胃ICR小鼠，研究乙酸乙酯部粗提物對機體炎症因子分泌以及氧化還原狀態的影響。結果顯示，荔枝果肉乙酸乙酯粗提物能夠顯著提高小鼠腹腔巨噬細胞吞噬能力（P＜0.05），增加小鼠血清和脾臟PGE2、NO水平與MDA含量（P＜0.05）。以上結果表明，荔枝果肉中含有的苯甲醇、氫化安息香、5-羥甲基糠醛等化合物能夠激活NF-κB和MAPK信號通路，誘導COX-2、iNOS等促炎性細胞因子基因表達，促進炎症因子的分泌，可能進而引發敏感人群的炎症性“上火”反應。
