《膠質瘤中AKT/β-catenin信號轉導通路轉錄調控miR-21的新機制》是依託天津醫科大學，由康春生擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：膠質瘤中AKT/β-catenin信號轉導通路轉錄調控miR-21的新機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：康春生
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
腦膠質瘤發病機制尚未明了，研究發現miR-21在膠質瘤中顯著過表達，是膠質瘤的重要分子標籤和治療新靶標。我們前期研究發現膠質瘤主要信號通路AKT/β-catenin參與miR-21的表達調控；生物信息學預測β-catenin下游轉錄因子在miR-21啟動子區有潛在結合位點。本課題擬探討膠質瘤中AKT/β-Catenin信號轉導通路轉錄調控miR-21的新機制。在確定AKT通過GSK-3β調控β-catenin通路轉錄活性的基礎上，套用β-catenin通路阻斷、異常累積激活以及突變激活這三種不同活性狀態的細胞模型，獲得膠質瘤中β-catanin信號通路對轉錄因子以及miR-21的調控關係，套用染色體免疫沉澱-PCR技術和螢光素酶報導基因質粒驗證目標轉錄因子（TCF4和c-Myc）與miR-21的轉錄調控關係。本研究可以發現膠質瘤信號轉導通路與miRNA-21轉錄水平異常調節的分子機制。
結題摘要
Wnt/β-catenin 和PI3K/AKT信號是與腫瘤發生，生長，增殖，和轉移相關的重要通路。β-catenin為Wnt通路中關鍵作用因子,可與TCF4結合，形成β-catenin/TCF4複合物發揮轉錄調控作用。此外，miR-21作為一種癌基因，在多種腫瘤中發揮致瘤作用。我們的研究表明Wnt/β-catenin 和PI3K/AKT信號通路之間存在相互調控，並與miR-21 存在調控關係。主要集中在以下3個方面。1， 下調PI3K/AKT信號的活性，通過調控β-catenin 介導的轉錄抑制膠質瘤細胞的生長。我們發現PI3K抑制劑LY294002可以抑制膠質瘤細胞系LN229和U251的增殖和侵襲能力，並且可以下調β-catenin 通路成員Fra-1, c-Myc和cyclin D1的表達。體內動物實驗也取得了相似的結果，瘤內注射LY294002不但下調了β-catenin 通路成員的表達，而且抑制了皮下腫瘤的生長速度。這些結果表明，PI3K/AKT信號通路調控膠質瘤細胞的增殖，部分是通過調節Wnt/β-catenin通路來實現的。2，β-catennin/TCF4複合物可轉錄調控膠質瘤中AKT1和AKT2的表達，並且阻斷β-catenin信號後可通過抑制多個癌基因的表達抑制EGFR信號通路的活性。在這些研究中，我們證實在AKT1和AKT2的啟動子區存在β-catenin/TCF4結合位點，下調β-catenin後，EGFR, STAT3，AKT1和PAKT的表達均下降，並且EGFR通路的下游基因也隨之下降。這些結果表明Wnt/β-catenin信號通路調節膠質瘤細胞的增殖和侵襲一定程度上是通過調控EGFR信號通路來發揮作用的。3. miR-21的表達受β-catenin/STAT3通路的調控，下調miR-21的表達可以抑制EGFR信號通路的活性。我們發現在人臍靜脈內皮細胞和膠質瘤細胞中，β-catenin可以調控miR-21的表達，並且這一調控過程依賴於STAT3的活性。進一步的研究證實在miR-21上游啟動子區存在一保守的STAT3結合位點。此外，當下調miR-21表達則可通過抑制EGFR信號通路的活性抑制膠質瘤的生長。總之，Wnt/β-catenin和PI3K/AKT信號通路相互作用並通過轉錄調控miR-21的表達，促進膠質瘤細胞生長，增殖和侵襲能力。
