膜雜交法在醋酸纖維膜或尼龍膜上固定靶DNA,再用探針與其雜交,洗去溶液中未結合的探針,乾燥後進行檢測。在DNA、RNA和蛋白質不同水平常用相應的雜交方法有三種,即Southerm印跡、Northem印跡和Western印跡。
基本介紹
- 中文名:膜雜交法
- 出處:《醫學遺傳學(第三版)》
膜雜交法在醋酸纖維膜或尼龍膜上固定靶DNA,再用探針與其雜交,洗去溶液中未結合的探針,乾燥後進行檢測。在DNA、RNA和蛋白質不同水平常用相應的雜交方法有三種,即Southerm印跡、Northem印跡和Western印跡。
DNA印跡雜交(DNA blot hybridization):1:將DNA或RNA溶液直接點樣於硝酸纖維素膜或尼農膜上(斑點或狹線印跡)2:經瓊脂糖凝膠電泳將片段的DNA或RNA轉移到膜上(Southern和Northern印跡法)。DNA在電泳前先用限制性內切酶消化。RNA印跡...
Northern雜交 主要用於分析RNA,包括正向雜交、反向雜交、斑點雜交。 DNA印跡實驗方法 正向Northern雜交是將待測RNA固定在纖維膜上,用特異序列DNA探針與其雜交,再顯影觀察。 反向Northern雜交是將特異序列DNA固定在纖維膜上,用待測RNA做成探針...
另一種相似的方法是將待測的RNA片段吸印在重氮苄氧甲基(DBM)纖維素膜或濾紙上,然後和預先製備的DNA探針進行分子雜交,這種方法稱為諾森吸印法。這些技術大大地推進了分子遺傳學研究和重組DNA技術的套用。原位(分子)雜交實際上是固相...
斑點雜交是指將待測的DNA變性後點加在硝酸纖維素膜(或尼龍膜、NC膜)上,用已標記的探針進行雜交,洗膜(除去未接合的探針),放射自顯影,判斷是否有雜交及其雜交強度,主要用於基因缺失或拷貝數改變的檢測。方法介紹 斑點雜交(Dot ...
一、DNA從凝膠到膜上的轉移方法64 二、Southern雜交膜67 三、核酸探針的標記68 第二節Southern印跡法的基本過程70 一、DNA樣品的酶切和電泳70 二、準備用於轉移的凝膠72 三、DNA從瓊脂糖凝膠轉移到固相支持物73 四、探針標記74 五、...