《腺苷A2A受體與HIF-1α互動作用對CLL細胞凋亡的調控及機制》是依託山東大學，由封麗麗擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：腺苷A2A受體與HIF-1α互動作用對CLL細胞凋亡的調控及機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：封麗麗
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
低氧-CD39/CD73-腺苷（ADO）-A2A/A2B系統在腫瘤細胞凋亡過程中發揮重要作用。慢性淋巴細胞白血病（CLL）患者骨髓白血病細胞高表達的低氧誘導因子-1α（HIF-1α）通過調節其靶基因的表達影響CLL細胞凋亡，但是ADO與HIF-1α互動作用對CLL凋亡的調控及機制目前尚未闡明。我們的前期研究發現，ADO不僅影響CLL細胞凋亡，同時影響HIF-1α表達。為明確HIF-1α與腺苷A2AR受體互動作用對CLL的影響及機制，我們通過細胞、分子、基因工程等技術，以CLL細胞株、轉基因小鼠及CLL臨床標本為研究對象，從體內、體外水平探討①A2AR與HIF-1α的互動作用機制，②A2AR與HIF-1α互動作用對CLL細胞凋亡的調控機制，③A2AR與HIF-1α共同作為CLL治療靶點的可能性。
結題摘要
低氧-CD39/CD73-腺苷（ADO）-A2A/A2B系統在腫瘤細胞凋亡過程中發揮重要作用。慢性淋巴細胞白血病（CLL）患者骨髓白血病細胞高表達的低氧誘導因子-1α（HIF-1α）在CLL細胞的凋亡過程中也發揮重要作用。ADO與HIF-1α互動作用對CLL凋亡的調控及機制目前尚未闡明。我們的研究發現，CLL患者骨髓中及外周血中CD39、CD73、A2AR和HIF-1α蛋白的表達顯著升高，且CD73及HIF-1α的表達水平與CLL患者的分期相關，A2AR的活化與CLL細胞增殖及HIF-1α的表達相關。套用HIF-1α慢病毒shRNA 對CLL細胞進行轉染，檢測轉染細胞的增殖及凋亡水平。結果提示HIF-1α+CLL細胞增殖率升高，凋亡減低，與預處理組（選擇性阻斷A2AR後轉染細胞）相比，細胞增殖水平較高，而凋亡率無明顯差異。套用Western-blotting明確HIF-1α+CLL細胞CD39、CD73、A2AR表達水平，結果提示CD39、CD73、A2AR表達隨HIF-1α表達升高而升高。利用TCL-1轉基因CLL小鼠模型，抽取其外周血及骨髓，我們的結果顯示，與正常小鼠相比，CLL小鼠外周血及骨髓ADO水平均增高，CD39、CD73、A2A受體、HIF-1α的mRNA及蛋白水平也均高於正常小鼠。小鼠血清中CD39及CD73均具有酶活性，可以水解ADP生成ADO。在小鼠CLL動物模型中，通過A2AR拮抗劑阻斷ADO對CLL白血病細胞的直接影響，我們發現，A2AR拮抗劑在體內可以顯著降低CLL小鼠外周血及骨髓的淋巴細胞計數，瘤負荷減輕。在小鼠CLL動物模型中，套用17-DMAG阻斷HIF-1α對CLL細胞的作用，CD39、CD73、ADO受體的表達均減低，CLL小鼠外周血及骨髓的淋巴細胞計數也低於未治療組。我們的結果首次深入探討了A2AR與HIF-1α的互動作用機制及對CLL細胞凋亡的調控機制，為CLL治療提供新的靶點。
