脫氧核糖核酸酶Ⅰ是一種核酸內切酶，最早由M．Kunitz結晶的所得。離子的存在對切斷方式有著明顯的影響。在不斷的研究發展過程中，也被作為一種研究材料。
脫氧核糖核酸酶Ⅰ是最有代表性的核酸內切酶。最早是由M．Kunitz從胰臟中分離出結晶的，也稱為胰脫氧核糖核酸酶或DNaseⅠ， EC3．1．21．1。分子量約3.1萬，等電點pH4.7，最適PH 7附近，需要Mg2 和Mn2 。分離單鏈和雙鏈DNA，產生具有 5′-磷酸末端的分解物。在一般條件下其分解產物含有1到8—12個寡聚核苷酸，平均大小等於四個核苷酸。反應初期似乎是先分解dpPupPy鍵，但因二價離子的存在對切斷的方式有顯著影響。因此酶容易得到結晶，所以於核酸的研究上廣泛套用；又由於對整個結構已經明確，因而也是酶化學研究的材料。
