檢測方法
依據醬油衛生標準GB 2717-2003,醬油中胺基酸態氮<0.40g/100ml,即表明醬油為不合格產品,針對胺基酸態氮主要有以下幾種檢測方法:
1.甲醛滴定法
GB 18186-2000《釀造醬油》規定,對醬油中胺基酸態氮檢測時,採用甲醛作為掩蔽劑,即用甲醛掩蔽胺基酸中的氨基,使溶液呈現羧基酸性,再在酸度計指示下,用氫氧化鈉標準溶液滴定,
2.比色法
原理:在PH4.8的乙酸鈉-乙酸緩衝液中,胺基酸態氮與乙醯丙酮和甲醛反應生成黃色3,5-二乙醯-2,6-二甲基-1,4二氫化吡啶胺基酸衍生物,在波長400nm處測定吸光度,與標準比較定量。
3. Hantzsch反應快速測定法
1.適用範圍
本方法適用於調味品中胺基酸態氮的測定。
2.原理
利用Hantzsch反應原理,用乙醯丙酮一甲醛混合溶液作為胺基酸的衍生試劑,測定調
味品中胺基酸態氮的方法。
3.試劑
顯色劑:15ml37%甲醛和7.8ml乙醯丙酮混合,加水至100ml,劇烈振搖混勻;緩衝溶液:pH4.8,1mol/L乙酸鈉與1mol/L乙酸用pH計調製混合;氨氮標準容液;
4.儀器
光柵分光光度計;pH計。
5.試樣的製備
液體樣品(如醬油等):直接取樣或水適量稀釋後取樣;半固體樣品(如面醬等):稱取5-10g於50ml或100ml量瓶內,水稀釋至刻度,濾紙過濾後取濾液測定;
固體試樣:取5-10g,加水20-50ml,用組織搗碎機搗碎後移入50ml或100ml量瓶內,水洗至刻度,取上清液或濾紙過濾後測定。
6.操作步驟
吸取
1.0-2.0ml試樣溶液或氨氮標準溶液(0~100ugNH3-N)於10ml比色管內,加4.0ml緩衝液、4.0ml顯色劑,水稀釋至刻度,混勻。於100℃水浴中加熱15min,取出用冷水冷卻至室溫,移入1cm比色皿內,以試劑空白為參比,波長400nm處測量吸光度。
7.結果計算
式中:
X試樣中AN含量,%;
A測得樣品吸光度;
M測得氨氮標準曲線的斜率(本法的斜率值為88.348);
W取樣量,ml或g;
V樣品稀釋總體積,ml;
V1測定時取樣體積,ml。
鑑別方法
胺基酸態氮指的是以胺基酸形式存在的氮元素的含量。胺基酸態氮是判定發酵產品發酵程度的特性指標。該指標不達標,主要是由於生產工藝不符合標準要求,產品配方缺陷或者是產品與已制定指標不匹配等原因造成的。
該指標越高,說明醬油中的胺基酸含量越高,鮮味越好。醬油中胺基酸態氮最低含量不得小於0.4g/100ml。
從醬油的原料表中可以看出,其原料是大豆還是脫脂大豆,是小麥還是麩皮,可知其原料檔次的高低。看清標籤上標註的是釀造醬油還是配製醬油。
如果是釀造醬油應看清標註的是採用傳統工藝釀造的高鹽稀態醬油,還是採用低鹽固態發酵的速釀醬油。
釀造醬油通過看其胺基酸態氮的含量可區別其等級,每百毫升的胺基酸態氮所含克數含量越高,品質越好(胺基酸態氮含量≥0.8g/100ml為特級,≥0.4g/100ml為三級,兩者之間為一級或二級)。
一般來說,特級、一級、二級、三級醬油的胺基酸態氮含量分別為≥0.8、≥0.7、≥0.55、≥0.4g/100ml。