《肝膽運輸系統在膽道閉鎖肝纖維化進展過程中的作用》是依託天津醫科大學，由楊慧琪擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：肝膽運輸系統在膽道閉鎖肝纖維化進展過程中的作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：楊慧琪
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
膽道閉鎖患者在行成功的引流手術後，有約三分之二的病人肝纖維化仍繼續進展成肝硬化而需要行肝移植手術。這一問題受到廣泛關注，但對於其機制的研究還沒有確切的結論。在前期工作中，從膽道閉鎖動物模型中觀察到早期的肝損害和纖維化，炎症反應和肝膽運輸基表達的變化。在本研究中，進一步研究肝膽運輸系統在膽道閉鎖形成中和形成後的變化，以及在疾病發展過程中肝纖維化的進展，明確肝膽運輸系統相關因子的表達水平與肝纖維化程度的相關性； 最後通過採用Farnesoid X receptor(Fxr)激活劑干擾小鼠膽道閉鎖模型，明確調節肝膽運輸系統起關鍵作用的核受基Fxr對肝纖維化進展的影響。預期結果為明確肝膽運輸系統在膽道閉鎖肝纖維化進展中的作用，為臨床提出有效干預肝纖維化進展的治療方法提供有意義的理論依據。
結題摘要
本課題主要研究膽道閉鎖的病理機制，驗證了炎症介導的肝膽運輸基表達改變和肝內膽酸淤積的發生早於膽道閉鎖的形成這一假說，同時闡明肝內膽管上皮細胞向肝間質細胞的轉化和Hedgehog 信號通路參與肝纖維化的發展過程，Farnesoid X receptor(Fxr)具有直接或者間接作用誘導Bsep表達。 膽道閉鎖的動物模型是通過採用輪狀病毒Rhesus Rotavirus (RRV)（MMU18006）腹腔注射出生18小時後新生小鼠（Balb/c）建立。 首先，體外觀察輪狀病毒對膽管上皮細胞的攻擊及炎症因子、肝膽運輸基的表達影響。在該動物模型上證實了肝纖維化開始於膽道閉鎖發展的早期。膽道閉鎖模型建立7天后，門靜脈周圍的纖維化已經出現炎症反應，膽道梗阻尚未發生，然而膠原蛋白Ⅰ，aSMA,和Tgf-β1的mRNA水平高表達。該階段，肝匯管區可檢測到S100a4表達，表明膽管上皮細胞向肝間質細胞的轉化現象也同時出現，同時Indian Hedgehog 信號通路的靶基因Gli-2和受體蛋白也被檢測到，此時肝外膽道梗阻尚未形，然而肝臟纖維化的過程已經發生。隨後，做了炎症對肝膽運輸基的影響研究。炎症導致肝膽運輸基相關基因下調，從而導致了肝內膽汁淤積。這是導致肝臟纖維化早期發生的主要原因。mRNA水平檢測肝膽運輸基和核受基在炎症作用下的變化，以及不同時間節點的變化。與正常對照組相比，BA組Fxr和Shp表達下降，14天時差異具有顯著性，21天后，它們表達再次增高，與正常對照無顯著性差異。Bsep下調與Fxr低表達一致，14天時差異具有顯著性。相同的模式也見於Pxr表達，雖然與正常對照的差異不明顯。與正常對照相比，BA組Ntcp表達低，14天時差異具有顯著性。與Ntcp不同，Oatp1表達水平在整個實驗階段無明顯變化。最後，用FXR增強劑GW4046處理膽道閉鎖的模型動物，在組織切片可觀察到膽管增殖、肝細胞壞死均減少，同時發現Fxr可以顯著上調BSEP的表達。該研究達到了課題設計的預期，驗證了假說，闡明了肝膽運輸系統在膽道閉鎖肝纖維化進展中的發展機制，Fxr具有有效干預肝纖維化進展的價值。
