《膽道閉鎖中miR-21介導PTEN信號通路對肝纖維化的作用機制》是依託復旦大學，由沈文俊擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：膽道閉鎖中miR-21介導PTEN信號通路對肝纖維化的作用機制
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：沈文俊
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
膽道閉鎖（BA）以肝內外膽管進行性炎症和纖維性梗阻為特徵，匯管區纖維化非常明顯。術後肝纖維化持續進展，往往需要接受肝移植。miRNA晶片中發現BA肝組織中miR-21表達升高，PCR驗證了miR-21的升高和靶基因PTEN的下降。文獻報導miR-21高表達於匯管區周圍。我們對BA模型小鼠腹腔內注射miR-21拮抗劑antagomir後，觀察到匯管區的纖維化程度減輕。匯管區纖維化的機制包括:肌纖維母細胞的活化和膽管上皮間充質轉化，目前miR-21對兩者的調控均無文獻報導。本課題擬進一步體外培養BA患兒的肌纖維母細胞及膽管上皮，觀察miR-21介導PTEN信號通路在其中的表達。在不同環節分別給予antagomir、LY294002處理，驗證miR-21對肌纖維母細胞活化和膽管上皮間質轉化的調控作用。在初步明確機制後，在動物模型中驗證作用機制及評估治療作用。
結題摘要
背景：微小RNA是一組在轉錄後水平對靶基因進行負調控的短鏈、非編碼RNA分子。越來越多的研究表明微小RNA參與了肝臟纖維化進程。膽道閉鎖肝臟纖維化有著持續迅速進展的特點。本研究著重於微小RNA-21在膽道閉鎖病理過程中的作用。 方法：我們分別收集膽道閉鎖及肝臟外傷的肝臟標本作為實驗組和對照組。我們用實時螢光定量PCR方法檢測微小RNA-21、PTEN及a-SMA在肝臟組織中的RNA表達量。通過Western blot和免疫組化的方法分析PTEN、a-SMA及磷酸化AKT在肝臟中的蛋白表達含量。 結果：我們發現在膽道閉鎖病人肝臟中微小RNA-21表達上調，通過3‘非編碼區負性調控PTEN後，活化了下游的AKT通路促進了肝臟纖維化，a-SMA表達升高。 結論：微小RNA-21/PTEN/AKT軸心在膽道閉鎖肝臟纖維化進程中發揮了促進作用，可以作為一個潛在的治療靶點。
