基本介紹
- 中文名：肉與肉製品鐵含量測定
- 外文名：Meat and meat products - Determination of iron content
原子吸收法,原理,試劑,儀器和設備,分析步驟,結果計算,精密度,分光光度法,原理,試劑,儀器和設備,分析步驟,結果計算,精密度,
原子吸收法
原理
試樣經乾法灰化或濕法消化後製成稀鹽酸溶液，直接導入原子吸收分光光度計中用空氣-乙炔火焰進行原子化，在248.3nm處測定，其吸光度與鐵離子濃度正比，與標準比較測定鐵含量。
試劑
若無特別說明，所用試劑均為分析純，所用水應符合GB/T 6682的要求。
（1）硝酸。
（2）高氯酸。
（3）鹽酸。
（4）硝酸溶液：硝酸+水=1+1。
（5）混酸消化液：硝酸+高氯酸=7+1。
（6）鹽酸溶液：鹽酸+水=1+1。
（7）鐵標準溶液（1000ug/mL）：國家有證標準物質，或按下述方法配置：稱取1.000g金屬鐵於燒杯中，加入50mL鹽酸溶液使之溶解，轉移至1000mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，混勻。
（8）鐵標準中間液（100ug/mL）：國家有證標準物質，或按下述方法配置：吸取鐵標準溶液5.00mL，用水定容至50mL。
（9）鐵標準使用液（10ug/mL）：吸取鐵標準溶液5.00mL，用水定容至50mL。
（10）硝酸溶液：硝酸+水=1+9。
儀器和設備
所有玻璃儀器均以硝酸溶液浸泡2h以上，用去離子水沖洗後晾乾或烘乾，方可使用。
實驗室常規設備及下列儀器。
（1）機械設備：用於式樣的均質。包括絞肉機、斬拌機等肉類組織粉碎機。
（2）馬弗爐：可控溫於550℃±20℃。
（3）乾燥箱。
（4）石英坩堝。
（5）分析天平：可準確稱重至0.001g。
（6）電熱板。
（7）原子吸收分光光度計。
分析步驟
試樣液製備
試樣準備
按GB∕T 9695.19規定的方法取樣。至少取有代表性的試樣200g，使用適量的機械設備，將試樣均質，均質後的試樣儘快分析，否則應密閉低溫貯存，防止試樣或成分發生變化，貯存的試樣在啟用時應重新混勻。
試樣消化
乾灰化法
稱取1-2g試樣（精確至0.001g）放入石英坩堝中，置於130±10℃乾燥箱中烘1h，使試樣脫水。將坩堝在在可調電爐上緩慢加熱，使試樣炭化，開始是用小火加熱，以防止試樣濺出，待大煙冒過後提高溫度，使試樣完全炭化，直至補冒煙為止。炭化好的試樣放入馬弗爐中，於550±20℃下灰化2h。灰化好的試樣應是灰白色，若灰分中有黑色碳粒，應取出坩堝，冷卻至室溫，加硝酸溶液濕潤，然後在電熱板上烘乾後，在至於550±20℃馬弗爐中灰化，直至灰分呈灰白色。
灰化好的試樣用1.25mL硝酸溶液溶解，轉移到25mL容量瓶中，用少量水沖洗石英坩堝多次，合併洗液，並用水稀釋至刻度，搖勻。此溶液為試樣液。
濕消化法
稱取1-2g試樣（精確至0.001g）放入100mL錐形瓶中，加入混酸消化液20mL，放入兩粒玻璃珠，蓋上小漏斗，靜置過夜。樣品在可調電爐上低溫緩慢加熱，以防產生大量泡沫和噴濺，消化至溶液顏色變淺，並有大量白煙時，將電爐關閉，用餘溫繼續加熱。當溶液出現淡黃、微綠接近無色時，從電爐上取下。若消化過程中溶液顏色變黑，應立即停止加熱，冷卻後補加適量混酸消化液，按原步驟操作直至消化完全。用10mL蒸餾水沖洗校漏斗及錐形瓶內壁，將錐形瓶置於150℃電熱板上蒸發至錐形瓶中液體接近2-3mL，取下冷卻至室溫。將樣品轉移至容量瓶中，用少量水多次洗滌錐形瓶，洗液合併到容量瓶中，並用水稀釋至刻度，搖勻，此溶液為試樣液。
標準工作液製備
精密吸取鐵標準使用液0.00mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL，分別置於25mL容量瓶中，加1.25mL硝酸溶液，用水稀釋至刻度，混勻。此時容量瓶中溶液的鐵濃度分別為0.00ug/mL、0.40ug/mL、0.80ug/mL、1.20ug/mL、1.60ug/mL、2.00ug/mL。
空白液製備
除不稱取試樣外，均按試樣消化步驟進行操作。
測定
根據儀器型號，將儀器調至最佳條件，將標準工作液、試樣液和空白液分別導入空氣-乙炔火焰原子吸收分光光度計中，測其吸光度。測定參考條件：燈電流15mA，波長248.3nm，狹縫0.2nm，空氣流量9.5L/min，乙炔流量3L/min，燃燒器高度7.5mm。
以標準工作液中鐵的濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪製標準曲線。根據試樣液的吸光度，從標準曲線上查出溶液中對應的鐵濃度值。
平行實驗
按以上步驟，對同一試樣進行平行試驗測定。
結果計算
按下式計算樣品中鐵的含量
X：試樣中鐵的含量，mg/kg；
c：從標準曲線上查得試樣液中鐵的濃度，ug/mL；
c0：從標準曲線上查的空白液中鐵的濃度，ug/mL；
V：試樣液定容體積，mL；
m：稱取試樣的質量，g。
結果取算術平均值，保留三位有效數字。
精密度
在重複性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不超過算術平均值的10%。
分光光度法
原理
試樣經乾法灰化或濕法消化後製成稀酸溶液，以鹽酸羥胺還原鐵(Ⅲ)還原為鐵(Ⅱ)，鐵(Ⅱ)與1, 10-菲囉啉在pH3～9範圍內形成穩定的紅色絡合物。在510nm處測量吸光度，以標準曲線計算鐵含量。
試劑
若無特別說明，所用試劑均為分析純，所用水應符合GB/T 6682的要求。
（1）乙醇。
（2）乙醇溶液（20%）：量取20mL乙醇、80mL水混勻。
（3）1, 10-菲囉啉（2.5g/L）:稱取0.25g 1, 10-菲囉啉，用乙醇溶液溶解並稀釋至100mL。
（4）鹽酸羥胺（50g/L）:稱取5.0g鹽酸羥胺，用水溶解並稀釋至100mL，臨用現配。
（5）酒石酸（100g/L）:稱取10g酒石酸，用水溶解並稀釋至100mL。
（6）乙酸鈉（500g/L）:稱取50g三水合乙酸鈉，用水溶解並稀釋至100mL。
儀器和設備
所有玻璃儀器均以硝酸溶液浸泡2h以上，用去離子水沖洗後晾乾或烘乾，方可使用。
實驗室常規設備及下列儀器。
分光光度計。
分析步驟
試樣液製備
試樣準備
按GB∕T 9695.19規定的方法取樣。至少取有代表性的試樣200g，使用適量的機械設備，將試樣均質，均質後的試樣儘快分析，否則應密閉低溫貯存，防止試樣或成分發生變化，貯存的試樣在啟用時應重新混勻。
試樣消化
乾灰化法
稱取1-2g試樣（精確至0.001g）放入石英坩堝中，置於130±10℃乾燥箱中烘1h，使試樣脫水。將坩堝在在可調電爐上緩慢加熱，使試樣炭化，開始是用小火加熱，以防止試樣濺出，待大煙冒過後提高溫度，使試樣完全炭化，直至補冒煙為止。炭化好的試樣放入馬弗爐中，於550±20℃下灰化2h。灰化好的試樣應是灰白色，若灰分中有黑色碳粒，應取出坩堝，冷卻至室溫，加硝酸溶液濕潤，然後在電熱板上烘乾後，在至於550±20℃馬弗爐中灰化，直至灰分呈灰白色。
灰化好的試樣用1.25mL硝酸溶液溶解，轉移到25mL容量瓶中，用少量水沖洗石英坩堝多次，合併洗液，並用水稀釋至刻度，搖勻。此溶液為試樣液。
濕消化法
稱取1-2g試樣（精確至0.001g）放入100mL錐形瓶中，加入混酸消化液20mL，放入兩粒玻璃珠，蓋上小漏斗，靜置過夜。樣品在可調電爐上低溫緩慢加熱，以防產生大量泡沫和噴濺，消化至溶液顏色變淺，並有大量白煙時，將電爐關閉，用餘溫繼續加熱。當溶液出現淡黃、微綠接近無色時，從電爐上取下。若消化過程中溶液顏色變黑，應立即停止加熱，冷卻後補加適量混酸消化液，按原步驟操作直至消化完全。用10mL蒸餾水沖洗校漏斗及錐形瓶內壁，將錐形瓶置於150℃電熱板上蒸發至錐形瓶中液體接近2-3mL，取下冷卻至室溫。將樣品轉移至容量瓶中，用少量水多次洗滌錐形瓶，洗液合併到容量瓶中，並用水稀釋至刻度，搖勻，此溶液為試樣液。
空白液製備
除不稱取試樣外，均按試樣消化步驟進行操作。
標準工作曲線的繪製
精確吸取鐵標準工作液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL，分別置於25mL容置瓶中，加鹽酸羥胺溶液2.5mL，搖勻後放置10min，加酒石酸溶液1mL，1,10-菲囉啉溶液5mL，乙酸鈉溶液2.5mL，稀釋至刻度，搖勻。此時容量瓶中溶液的鐵濃度分別為0.00ug/mL、0.40ug/mL、0.80ug/mL、1.20ug/mL、1.60ug/mL、2.00ug/mL。在510nm處測其吸光度，以標準工作液中鐵的濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪製標準曲線。
測定
精確吸取10mL試樣溶液、空白液分別置於25mL容量瓶中, 以下按照標準工作曲線的繪製步驟進行。根據試樣液的吸光度，從標準工作曲線中查得鐵的質量。
平行實驗
按以上步驟，對同一試樣進行平行試驗測定。
結果計算
按下式計算樣品中鐵的含量
X：試樣中鐵的含量，mg/kg；
A：從標準曲線上查得試樣液中鐵的質量，ug；
A0：從標準曲線上查的空白液中鐵的質量，ug；
V1：測定用消化液的體積，mL；
V2：樣品消化液的總體積，mL；
m：稱取試樣的質量，g。
結果取算術平均值，保留三位有效數字。
精密度
在重複性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不超過算術平均值的10%。
