基本介紹
- 中文名：美白功效評價
- 類別：評價方法
膚色影響因素,分類,體外法,在體法,方法選擇原則,
膚色影響因素
人類膚色多種多樣，皮膚的顏色主要由皮膚中色素的含量及分布決定，皮膚中的色素主要有黑褐色的黑色素(包括優黑素和褐黑素)、紅色的血紅素和黃色的胡蘿蔔素等。其中黑色素是皮膚顏色最主要的決定因素，它是由黑素細胞產生的。除色素外，皮膚結構上的差異、生活環境、年齡、食物和疾病等也會使膚色產生變化。
對於皮膚黑色素產生的調控主要有黑色素合成酶的調節、黑素細胞的調節和黑色素的排泄等途徑，相對應的皮膚美白劑包括黑色素合成酶抑制劑、黑素細胞增殖抑制劑、黑色素運輸阻斷劑、自由基清除劑、皮膚剝脫劑和遮光劑等。基於黑色素形成的複雜生物學機制以及美白活性成分可能同時作用多個靶點或者達到多種酶的抑制效果，化妝品美白功效需要在了解配方思路的基礎上，多角度多層面進行綜合評價。
分類
美白功效評價方法大致可分為體外法和在體法。
體外法
體外法包括生物化學法、物理化學法、細胞生物學法和三維重組皮膚模型替代法等。
生物化學法主要通過評估美白活性成分對酪氨酸酶的抑制率和對自由基的清除率來表征其美白功效，如體外酪氨酸酶抑制法、抑制 L－多巴氧化法和 DPPH 分析法等方法，此類方法操作簡單、結果呈現快速、所需成本低，適用於對美白活性成分的初篩和高通量篩選。
對一些美白機制和量效關係較為明確的美白成分，可通過分析儀器對化妝品中美白成分的種類及含量進行測定，從而間接表征其美白功效。對待測化妝品進行前處理後，採用高效液相色譜(HPLC)、氣相譜(GC)等分析檢測儀器檢測待測物中的特徵成分，以此判斷其美白效果。物理化學法僅適用於評價有已知美白成分的化妝品，如熊果苷、煙醯胺、抗壞血酸及其衍生物等美白成分，對於結構和成分較複雜的活性物或提取物，不能使用該方法評價其美白效果。
細胞生物學法通過在體外培養特定的細胞模型，並採用分光光度法、圖像分析技術等方法在模型中進行細胞毒性測定、細胞內酪氨酸酶活性測定和黑色素含量測定等，對待測物質的美白功效進行評價。細胞生物學法易於觀測化妝品中活性物質對細胞生長的抑制程度，便於研究美白活性成分與其他協同因子的聯合作用以及進行細胞毒性測試等。
三維重組皮膚模型是體外構建的具有三維結構的人工皮膚組織模型，其方法是利用組織工程技術將人源皮膚細胞培養於特殊的插入式培養皿上。通常使用含黑色素細胞的皮膚模型評價化妝品的美白功效，將待測物塗抹於皮膚模型作用一定時間後，進行酪氨酸酶活性測定、黑色素含量測定、檢測相關酶表達等，還可藉助像素分析軟體定量檢測角質細胞攝取黑色素的量，以及檢測培養基中角質細胞釋放的炎症因子的含量變化等。
在體法
在體法可分為動物實驗法、主觀評價法和客觀儀器評價法等方法。
由於豚鼠皮膚黑素細胞和黑素小體的分布近似於人體，可選用動物實驗法進行美白功效評價，一般採用的是黑色或棕色成年豚鼠，在其背部兩側剃毛形成若干無毛區，將待測樣品均勻塗布於該區域，一段時間後對該區域的皮膚進行組織學觀察；也可以採用花色豚鼠建立美白功效評價動物模型，如利用紫外線連續照射豚鼠皮膚7 d 形成皮膚黑化模型，在受試部位塗抹待測樣品，利用皮膚生物物理檢測技術，同時結合組織化學染色及圖像分析技術對皮膚黑素顆粒進行定量分析，評價產品的美白效果。
主觀評價法包括視覺評估和受試者自我評估，自我評估多採用調查問卷形式進行，視覺評估包括對受試者的膚色和色斑等皮膚情況進行評估。其中，膚色評估通過將人的膚色與標準色卡相比較進行評價，膚色卡基於大量的樣本採集並結合計算機軟體製作而成，能夠反映一定範圍內的膚色情況。對於評價色斑的改善情況，可由專業的評測人員對色斑面積大小、嚴重程度等進行評估。主觀評價法因其存在主觀因素，需與客觀儀器評價等其他方法結合，從而全面地表征化妝品的美白功效。
客觀儀器評估是通過儀器對受試者使用化妝品前後的皮膚狀態參數進行採集、樣本分析或統計分析，進而對化妝品進行功效評價的一種方法。在評價化妝品的美白功效時，一般遴選一定數量的志願者，將美白劑塗於人體皮膚上，藉助客觀儀器，觀察塗敷美白劑前後 膚色特徵指標的變化，以評價美白效果；也可選用紫外線誘導的人工黑化模型作為受試部位進行實驗，實驗中需要選擇一種已知有效的脫色物質作為陽性對照進行比較，來判斷待測物質的脫色效果。在採用客觀儀器法進行美白功效評價時，常見選擇國際照明委員會(CIE)規定的 Lab 色度系統測量受試部位的皮膚顏色變化；也可使用類似Mexameter MX18皮膚黑色素測試儀進行評價，其結果輸出以黑素指數(MI)和紅斑指數(EI)表示，它是基於光譜吸收的原理(RGB)，通過特定波長的光照在人體皮膚上的反射量來確定皮膚中黑色素含量，如果測量所得 MI 越高，說明皮膚中所含的黑色素就越高。另外，套用VISIA 皮膚檢測儀進行圖像分析也可以評價化妝品的美白功效，VISIA 皮膚檢測儀主要通過對化妝品使用前和使用後的面部圖像進行直觀比較，以及對圖像軟體處理得到的面積值、百分比值、方差值、斑點個數等數據進行統計分析，來表征化妝品的美白功效。
方法選擇原則
實驗目的不同，選擇評價方法時可有所側重，生物化學法和細胞生物學法簡便快捷，重現性好，但並不能準確、客觀地反應其施用於人體上的實際效果，適用於美白活性成分的高通量初步篩選；在體法可直觀反映各種不同機制的美白化妝品對皮膚的最終效果，但其指標複雜、成本高、周期長、實驗形式受限。生物技術、計算機圖像識別技術尤其是基因晶片技術和基於網際網路的大數據技術的快速發展，為進一步準確了解美白機理、全面科學進行功效評價提供了技術支持，也是未來化妝品功效性評價方法的發展趨勢。
