線蟲抑制性土壤中植物內生真菌的多樣性研究

《線蟲抑制性土壤中植物內生真菌的多樣性研究》是喬敏為項目負責人,雲南大學為依託單位的地區科學基金項目。

基本介紹

  • 中文名:線蟲抑制性土壤中植物內生真菌的多樣性研究
  • 項目類別:地區科學基金項目
  • 依託單位:雲南大學
  • 項目負責人:喬敏
項目摘要,結題摘要,

項目摘要

作物病原線蟲在我國危害嚴重,尋找安全穩定的生物防治措施漸成為關注的熱點。線蟲抑制性土壤中植物部分兼性內生真菌對線蟲有抑制活性,可能是抑制性土壤發揮作用的功能群之一,因其種種優勢,將其開發成線蟲生防製劑是一條獨特和經濟有效的途徑。本項目瞄準對各種蔬菜影響影響較為嚴重的根結線蟲,系統調查三種易感植物栽培區,鑑定生物抑制性土壤的基礎上,分離鑑定可培養內生真菌,評估優勢種的抑制線蟲活性,聯合ITS、TUB、RPB三個片段對優勢種進行遺傳多樣性分析,用RT-PCR對其根內定殖能力進行研究,為篩選到既能高效抑制線蟲又能與宿主建立穩定共生關係和具廣譜基因型的生防菌株奠定基礎。通過rRNA基因的寡核苷酸指紋圖譜法分析根內和卵上的真菌,結合可培養優勢內生真菌各方面特性評估內生真菌在抑制性土壤中的貢獻,從內生真菌的角度探索線蟲抑制性土壤發揮作用的生態機制。

結題摘要

線蟲抑制性土壤中植物部分兼性內生真菌的殺線蟲活性,為線蟲生防製劑開發提供了一條獨特和經濟有效的途徑。本項目以抑制性土壤及其栽培區內易感作物內生真菌和根際真菌為研究對象,評估了其抑制線蟲能力,並對抑制性土壤抑制線蟲機制進行了探索。研究結果表明抑制性土壤對根結線蟲的抑制作用與土壤根結線蟲初始蟲口密度之間存在密切的負相關性。抑制性土壤中優勢真菌屬主要有:Fusarium,Trichoderma,Aspergillus,Chaetomium,Mucor,Absidia,Paecilomyces。對其中的300個菌株殺線蟲活性分析,發現大部分菌株具有殺線蟲活性,其中Aspergillus niger H1-1, F25, E34, D16等14株真菌的培養物24小時能殺死60%的根結線蟲。我們推測這些菌株是抑制性土壤能夠抑制線蟲的關鍵因子。在非抑制性土壤中,這些真菌出現的頻率較低或出現後不具備殺線蟲活性。對殺線蟲活性較強的三個代表菌株Aspergillus niger F25、H1-1、D16進行了發酵條件的最佳化並明確了對應的最佳發酵工藝,在最優條件下,F25、D16和H1-1發酵液8小時對靶標線蟲的致死作用分別達到100%、99.2%和99.7%。分析了這三株菌株的代謝活性產物:D16菌株的活性產物為草酸鈣配位化合物,初步確定了另外兩株菌株代謝產物的基本化學性質。最後在劑型研究的基礎上,通過溫室和田間實驗評價了兩菌株對根結線蟲的防治效果及在根部的定殖能力。最終篩選到兩株既能高效抑制線蟲又能與宿主建立穩定共生關係的生防菌株,同期防治效果高於噻唑膦和阿魏菌素,有很好的套用前景。

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