細菌鑑定

細菌鑑定是指將未知細菌按生物學特徵放入系統中某一適當位置和已知菌種比較其相似性，並通過對比分析方法確定細菌分類地位的過程。細菌鑑定方法包括生化鑑定、核酸檢測、血清學鑑定、自動化儀器鑑定及質譜技術等。

基本介紹

• 中文名：細菌鑑定
• 鑑定方法：生化鑑定、血清學鑑定等

細菌鑑定步驟

在實驗室中，主要是根據所用的鑑定儀器特點、感染性疾病的類型、標本種類、採集部位等因素建立具體的微生物學檢驗程式。大致步驟如下。

1．獲得被鑑定菌種的純培養菌落。

2．確定染色（革蘭染色、抗酸染色）、形態和排列，按科、屬、種依次鑑定下去。

3．運用知識、經驗、最小數量的試驗方法做出鑑定。

細菌鑑定方法

1．生化鑑定

是細菌鑑定中最重要的一種，主要是藉助細菌對營養物質分解能力的不同及其代謝產物的差異對細菌進行鑑定，包括蛋白質分解產物試驗、觸酶試驗、糖分解產物試驗、氧化酶試驗、凝固酶試驗等。

2．血清學鑑定

適用於含較多血清型的細菌，常用方法是玻片凝集試驗，並可用免疫螢光法、協同凝集試驗、對流免疫電泳、間接血凝試驗、酶聯免疫吸附試驗等方法快速、靈敏地檢測樣本中致病菌的特異性抗原。用已知抗體檢測未知抗原（待檢測的細菌），或用已知抗原檢測患者血清中的相應抗細菌抗體及其效價。血清學鑑定操作簡單快速，特異性高，可在生化鑑定基礎上為細菌鑑定提供確定診斷。

3．分子生物學檢測

適用於人工培養基不能生長、生長緩慢及營養要求高不易培養的細菌，檢測方法包括核酸擴增技術、核酸雜交、生物晶片及基因測序等。常見的核酸擴增技術有聚合酶鏈反應、連線酶鏈反應等，主要用於耐甲氧西林、結核分枝桿菌等病原菌的檢測。核酸雜交有斑點雜交、原位雜交等，用於致病性大腸埃希菌、沙門菌、空腸彎曲菌等致病菌的檢測。生物晶片包括基因晶片和蛋白質晶片，主要是對基因、蛋白質、細胞及其他生物進行大信息量分析的檢測技術。

4．微生物自動鑑定系統鑑定

可快速、準確地對臨床近千種常見分離菌進行鑑定，目前已在臨床實驗室廣泛使用。其中，細菌16S rRNA編碼基因已成為較理想的基因分離靶序列，逐漸成為臨床細菌鑑定、分離的金標準。

5．質譜技術

是近年來發展起來的一種新型的軟電離生物質譜，用於分析細菌的化學分類和鑑定，具有高靈敏度和高質量檢測範圍的優點。主要是對核酸、蛋白質、多肽等生物大分子串聯質譜進行分析。

臨床意義

細菌鑑定是分類學的一個組成部分，臨床細菌鑑定可將細菌鑑定至屬和種，在細菌快速檢測、細菌耐藥性檢測及感染細菌的流行病學調查中得到日益廣泛的套用。